中华人民共和国国家标准
GB/T37500-2019
肥料中植物生长调节剂的测定 高效液相色谱法
Determination of plant growth regulators in fertilizer-High performance liquid chromatography
中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中国石油和化学工业联合会提出.
本标准由全国肥料和土壤调理剂标准化技术委员会（SAC/TC105）归口.
研究院、云南省化工产品质量监督检验站、四川国光农化股份有限公司、山东农大肥业科技有限公司、上 本标准起草单位：上海化工研究院有限公司、山东省产品质量检验研究院、黑龙江省质量监督检测海化工院检测有限公司.
本标准主要起草人：苏本玉、张娟、段路路、柳羽丰、丁方军、吴攀道、魏厚道、毛红祥、朱海荣、刘卫、吴凡、姚莎.
肥料中植物生长调节剂的测定 高效液相色谱法
题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件. 警示一一使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验.本标准并未指出可能的安全问
1范围
本标准规定了肥料中植物生长调节剂含量的高效液相色谱测定方法.
本标准适用于水溶性肥料、复合肥料、复混肥料、掺混肥料等肥料中复硝酚钠、2.4二氯苯氧乙酸（简称2，4-D）、脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑、吲哚-3-乙酸、吲噪丁酸含量的测定.
本标准中各目标物的方法检出限和定量限分别为：复硝酚钠3mg/kg和10mg/kg;2，4-D5mg/kg和10mg/kg：脱落酸、萘乙酸、氯吡豚、烯效唑3mg/kg和 10mg/kg；吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸 5 mg/kg和l 10 mg/kg.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样用甲醇进行超声提取，在选定的工作条件下，用高效液相色谱仪（配有二极管阵列检测器）进行测定，以保留时间定性，外标法定量.
4试剂和材料
4.1除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中的一级水，
4.2甲醇：色谱纯.4.3乙晴：色谱纯. 4.4甲酸：色谱纯.4.6冰乙酸：优级纯.4.7甲酸溶液（11000）：移取1.0mL甲酸（4.4）与1000mL水混匀.4.8乙酸铵溶液（0.77g/L）：称取0.77g乙酸铵（4.5)，用水溶解并定容至1000ml.4.102-硝基苯酚钠、4-硝基苯酚钠、5-硝基邻甲氧基苯酚钠、2.4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑、吲哚-3-乙酸、吲噪丁酸标准品：已知质量分数，w≥98.0%，信息参见附录A中表4.11复硝酚钠标准储备溶液：称取适量的2-硝基苯酚钠、4-硝基苯酚钠、5-硝基邻甲氧基苯酚钠标准 A.1.
4.5乙酸铵：色谱纯.
4.9冰乙酸溶液（150）：移取20.0mL冰乙酸（4.6）与1000mL水混匀.
GB/T 37500-2019
4.12复硝酚钠标准溶液：准确移取适量的复硝酚钠标准储备溶液（4.11）.用甲醇稀释成200mg/L的 品，用甲醇配制成各个标准物质浓度为2000mg/L的标准储备溶液.复硝酚钠标准溶液.4.132，4-D标准储备溶液：称取适量的2，4-D标准品，用甲醇配制成浓度为2000mg/L的标准储备4.142，4-D标准溶液：准确移取适量的2，4-D标准储备溶液（4.13）.用甲醇配制成浓度为200mg/L 溶液.的2，4-D标准溶液.现用现配.4.15脱落酸、茶乙酸、氯毗脲、烯效唑标准储备溶液：称取适量的脱落酸、萘乙酸、氯毗脲、烯效唑标准品，用甲醇配制成浓度为4000mg/L的标准储备溶液.4.16脱落酸、茶乙酸、氯吡腺、烯效唑混合标准溶液：准确移取适量的脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑 标准储备溶液（4.15），用甲醇配制成浓度为400mg/L的脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑混合标准溶液.现用现配.4.17吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸标准储备溶液：称取适量的吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸标准品，用甲醇配制成浓度为2000mg/L的标准储备溶液. 4.18吲哚-3-乙酸、吲噪丁酸混合标准溶液：准确移取适量的吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸标准储备溶液（4.17），用甲醇配制成浓度为200mg/L的吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸混合标准溶液.现用现配.
5仪器与设备
5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（PDA）.5.2色谱数据处理机.5.3微量注射器：50pL5.4高速离心机：最高转速不低于4000r/min. 5.5涡混合器.5.6超声波清洗器.5.7电子天平：精度0.1mg.5.8金属试验筛：0.5mm.5.9有机相微孔滤膜：0.22pm.
6测定步骤
6.1样品制备
固体样品应粉碎至全部过0.5mm试验筛，待用.液体样品混匀后直接称量.
6.2试液提取
称取0.1g~1.0g试样（精确至0.0001g）置于10mL离心管中，加人10mL甲醇（4.2），误旋振荡1 min，超声提取30min后冷却至室温，用甲醇定容，高速离心10min，取1mL上清液过0.22μm有机相滤膜，待测.
6.3高效液相色谱参考条件
6.3.1复硝酚钠色谱参考条件如下：a）色谱柱：250mm×4.6mm（内径）不锈钢柱，内装Atlantis@T：、5.0μm填充物（或具有同等效2 果的色谱柱）；
b）流动相：甲醇（4.2）0.1%甲酸溶液（4.7）=5545（体积比），经滤膜过滤，并进行脱气：c）流速：0.8mL/min:d）柱温：35℃：）进样量：10pL e）检测波长：254nm；
6.3.22，4-D色谱参考条件如下：
a）色谱柱：250mm×4.6mm（内径）不锈钢柱，内装RP18、5.0pm填充物（或具有同等效果的色谱柱）；b）流动相：乙晴（4.3）乙酸铵溶液（4.8）=6040（体积比）； 流递：0.8mL/min;d）柱箱温度：35℃； c）e）检测波长：283nm;f）进样量：10μL
6.3.3脱落酸、茶乙酸、氯吡脲和烯效唑色谱参考条件如下：
色谱柱：250mmX4.6mm（内径）不锈钢柱，内装RP、5.0pm填充物（或具有同等效果的色a) 谱柱）；b）流动相：流动相及梯度洗脱条件见表1：c) 流速：1.0mL/min;d) e） 柱温：室温： 检测波长：氯吡豚、烯效唑、脱落酸最佳检测波长为258nm，茶乙酸最佳检测波长为280nm；进样量：10μL.
6.3.4吲噪-3-乙酸、吲噪丁酸色谱参考条件如下：
a）色谱柱：250mm×4.6mm（内径）不锈钢柱，内装RP、5.0pm填充物（或具有同等效果的色b）流动相：流动相及梯度洗脱条件见表2； 谱柱)；流递：1.0mL/min;柱温：室温；f) 检测波长：280nm； 进样量：10μL.
表1高效液相色谱条件
时间 流动相[甲醇（4.2>] 流动相[0.1甲酸溶液（4.7)]min7 0 0 30 45 70 5513 0 55 4518 0 80 2026 0 90 1026 1 30 7033 0 30 70
