中华人民共和国国家标准
GB/T 35534-2017
胰酪蛋白陈检测方法
Examination methods of pancreatic digest of casein
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口.本标准起草单位：北京牛牛基因技术有限公司、中国食品药品检定研究院. 本标准主要起草人：胡昌勤、牛刚、苏德模、马仕洪、杨美琴、伍业旭、葛秋蕙.
胰酪蛋白陈检测方法
1范围
本标准规定了胰酪蛋白陈作为培养基原料的质量检测方法.本标准适用于药品、食品、化妆品或其他类别微生物检验用培养基中胰酪蛋白陈的质量检测.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB5009.11-2014食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定 GB5009.15食品安全国家标准食品中辐的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB5009.44-2016食品安全国家标准食品中氯化物的测定GB5009.124食品安全国家标准食品中氨基酸的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T23530酵母抽提物中华人民共和国药典2015年版四部澄清度检查法（通则0902）中华人民共和国药典2015年版四部氮测定法（通则0704）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
胰酪蛋白陈pancreatic digest of casein
用酪蛋白经胰酶水解、中和、过滤、浓缩精制而成的粉末.常用名：胰陷陈、胰酶水解酪蛋白等.
酪蛋白casein
哺乳动物奶中的主要蛋白质.用于制造培养基用胰酪蛋白陈的酪蛋白主要通过牛奶脱脂后加酸或粗制凝乳酶的作用，形成的凝固沉淀物制得.又称：干酪素、酪肮、乳酪素、奶酪素等.
耐热菌数count of heat resistant microorganisms
胰酪蛋白陈中存在的具有热抗性的微生物，主要为耐热芽孢菌.胰陷蛋白陈耐热菌数为10%胰酪蛋白陈溶液在沸水浴中处理30min后，经胰酪大豆陈琼脂（TSA）平板计数得到的菌落数，以CFU/g表示.
4缩略语
下列缩略语适用于本文件.CFU：菌落形成单位（colony formingunits） TSA：胰酪大豆陈琼脂培养基（soybean-casein digest agar)TSB：胰酪大豆陈液体培养基（soybean-casein digest broth）
5标准菌株
铜绿假单胞菌（Psencdomonas aerginosa）[CMCC(B)10104] 金黄色葡萄球菌（Sraplylococcusaarens）[CMCC（B）26003]滕黄微球菌（Micrococcux ateus）[CMCC（B）28001]桔草芽孢杆菌（Bucil//ussubtillis）[CMCC（B）63501]乙型副伤寒沙门菌（Satmonella paratyphi B）[CMCC（B）50094]白色念珠菌（Candidaαlbicans）[CMCC（F）98001]
6试剂配制
6.1总则
除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，在未特别注明时，按照GB4789.28规定执行.水应符合GB/T6682中三级水的规定，未注明何种溶液配制时，均指水溶液.未注明何种条件下灭菌时，均指121C、15min高压灭菌.
6.20.5%磷酸氢二钾
称取5gKHPO加水定容至1000mL.
6.31mol/L氢氧化钠
称取40gNaOH加水定容至1000mL.
6.40.9%灭菌氯化钠溶液
称取9gNaC1加水定容至1000mL，灭菌后备用.
6.51mol/L氢氧化钾
称取56g氢氧化钾加水定容至1000mL.
6.61mol/L盐酸
取浓盐酸约90mL，加水适量使成1000mL，摇匀备用.
6.7TSA
胰陷蛋白陈15g，大豆陈5g，氯化钠5g，琼脂15g，水1000mL.
6.8 TSB
胰酪蛋白陈17g.大豆陈3g，氯化钠5g，葡萄糖2.5g，磷酸氢二钾（钠）2.5g，水1000mL.
7检测方法
7.1外观
取样品适量置明亮处，自然光下肉眼观察性状和色泽.
7.2理化指标
配制2%水溶液，采用玻璃电极测定灭菌后的pH值.同一样品两次测定值之差应不超过0.04.
7.2.2水分
按照GB5009.3规定执行.
7.2.3灰分
按照GB5009.4规定执行.
7.2.4澄清度
取样品适量制备2%水溶液灭菌后放置至室温，按照《中华人民共和国药典>2015年版四部澄清度检查法（通则0902）第一法（目视法）执行.
7.2.5磷酸盐沉淀
取样品适量，以0.5%磷酸氢二钾（0.03mol/1）溶液制备成2%溶液，如需要，调节pH7.5土0.1，
7.2.6碱性沉淀
取样品适量，配制成2%水溶液，以1mol/L氢氧化钠溶液调节pH8.5±0.5，121C高压灭菌30min，置20C士10C冷却，冷却后平衡30min观察是否有沉淀.
7.2.7氯化钠
按照GB5009.44-2016中第一法“电位滴定法”规定执行.
7.2.8总氮
按照《中华人民共和国药典32015年版四部氮测定法（通则0704）规定的方法执行.
7.2.9氨基酸态氮
按照GB/T23530规定的方法执行.
7.2.10总游离氨基酸
按照GB5009.124的规定执行，取消水解步骤，样品称取后直接用pH2.2的缓冲液1mL溶解后供
