ICS67.100.10 X16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3313-2018 生乳中B-内酰胺酶的测定 Determination of B-lactamase in raw milk 2018-12-19发布 2019-06-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3313-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出. 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC274)归口. 本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、农业农村部奶产品质量安全风险评估实验 室（北京）、农业农村部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京）. 本标准主要起草人：郑楠、刘慧敏、屈雪寅、王加启、李松励、杨晋辉、赵晨、文芳、祝杰妹、叶巧燕. I NY/T3313-2018 生乳中β-内酰胺酶的测定 1范围 本标准规定了生乳中-内酰胺酶测定的杯碟法和胶体金快速试纸条法. 本标准适用于生牛乳、生羊乳、生水牛乳中-内酰胺酶的测定. 本标准第一法检出限为生牛乳4U/mL生羊乳3U/mL生水牛乳1U/mL;第二法检出限为4 U/mL. 2规范性引用文件 0 PUBLIS 下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注目期的引 件，仅注期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件其最新版本（包括的修改单适用 文件. GB/T6682 分析实验空用水规格和试验方法 NY/T3051—2016 E乳安全指监测前样品处理规薄 第一法杯碟法 RESEA 3原理 采用对青霉素药物敏感的藤黄微球菌通过舒巴坦特异性抑制内酰胺酶的活性，以青霉素作 为对照，比较加人舒口坦与未加人舒巴坦的样品产生的抑菌圈大小间接测定样品中是否含有-内 酰胺酶. 4试剂或材料 170 除非另有规定，仅使用分析纯试剂 H CEN 4.1水：GB/T6682 级 4.2磷酸盐缓冲液(H6 称取89无水磷酸氯钾，2.0g无水磷酿季7 二钾，溶解于水中，用盐酸 溶液(0.1mol/L)调节pH至0、定容至1L 121高压灭菌5min 刀 4.3生理盐水(8.5g/L):称取85g氯化钠，溶解手1L水中121C高压灭菌15min. 4.4菌悬液：将试验菌株[藤黄微球菌(Micrococcus luteus)CMCC(B)28001 又名嗜根考克氏菌 (Kocuria rhizophila)CICC10445]接种手营养琼脂培养基(4.8)斜面上，经生化培养箱(5.1)培养 18h~24h 用生理盐水(4.3)洗下菌苔即为菌悬液.菌悬液浓度用光度计测定，在450nm测量其200 倍稀释液，吸光度值约为0.89，即终浓度约为1X10CFU/mL.菌悬液现用现配. 4.5B-内酰胺酶标准溶液(4000U/mL):用磷酸盐缓冲液(4.2)将B-内酰胺酶标准品(300万U/mL) 制备成浓度为4000U/mL的标准溶液.现用现配. 4.6舒巴坦标准溶液(1mg/mL):准确称取10mg(精确至0.1mg)舒巴坦标准物质，用磷酸盐缓冲液 (4.2)溶解并定容至10mL.现用现配. 4.7青霉素标准溶液(0.1mg/mL):准确称取10mg(精确至0.1mg)青霉素参考标准物质(Penicillin G Sodium 青霉素G钠盐)，用磷酸盐缓冲液(4.2)溶解并定容至100mL.现用现配. 4.8营养琼脂培养基：见附录A中的A.1. 4.9抗生素检定培养基Ⅱ：见A.2. 1 ...
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