NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T4723-2025
食用菌中硒代氨基酸的测定
Determination ofSeleno-aminoAcidsinediblemushroom
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部农产品质量安全监管司提出.
本文件由农业农村部农产品营养标准专家委员会归口.
本文件起草单位：江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所、南昌市疾病预防控制中心、赣州市综合检验检测院、江西省林业科学院、江西省农学会、江西省农业科学院农业应用微生物研究所、江西省农业科学院农产品加工研究所、绿城农科检测技术有限公司、于都县农业农村局、宁都县农业农村局.
本文件主要起草人：胡丽芳、周瑶敏、徐俊、金永久、周龙华、高伟、廖且根、张标金、谢敏、聂根新、邱素艳、李伟红、魏云辉、刘光宪、费丹、广业兰、沈思言、温志刚、王玫、章虎、张玉换、沈荣明、郭彩霞、张贤源.
食用菌中硒代氨基酸的测定
1范围
色谱-电感耦合等离子体质谱测定方法. 本文件描述了食用菌中硒代半胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的液相色谱-申联质谱和液相
本文件适用于食用菌中硒代半胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸含量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
方法一液相色谱-串联质谱法
4原理
试样中晒代半胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸用蛋白酶和崩溃酶水解提取，经超滤管离心
净化，液相色谱-申联质谱仪测定，外标法定量.
5试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.2甲酸（HCOOH）：色谐纯.5.1.3蛋白酶（CAS号：9036-06-0)：酶活力≥3.5U/mg- 5.1.4前溃酶（CAS号：85186-71-6）：BR.蛋白≥10%（双缩脲法），纯度>98%.5.1.5抗坏血酸（CHOCAS号：50-81-7）.5.1.6三羟甲基氨基甲烷（CHNO，CAS号：77-86-1）5.1.7盐酸（HC1):12mol/L.
5.2.120.0mg/mL蛋白酶溶液：称取蛋白酶（5.1.3)1.00g，用水稀释定容至50mL 摇匀，现用现配.5.2.20.2mol/L抗坏血酸溶液；称取抗坏血酸（5.1.5)3.52g，用水稀释定容至100ml，摇匀，备用，现 用现配.5.2.310.0mmol/LTris-HC1缓冲溶液：称取0.606g三羟甲基氨基甲烷（5.1.6）溶于450mL水中，用盐酸（5.1.7）调节pH至7.5，加水稀释定容至500mL，摇匀.5.2.40.1%甲酸溶液：量取甲酸（5.1.2）0.1mL，加水定容至100mL，摇匀.
NY/T 4723-2025
5.3标准品5.3.1硒代半胱氨酸（CH，NOSe，CAS号：10236-58-5）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质或标准溶液.5.3.2甲基硒代半胱氨酸（CH NOSe，CAS号：26046-90-2）：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物 质证书的标准物质或标准溶液.5.3.3晒代蛋氨酸（CHNOSe.CAS号：1464-42-2）：纯度≥98%，或经国家认证并授子标准物质证书的标准物质或标准溶液.5.4标准溶液配制5.4.1硒代半胱氨酸标准储备液（100mg/L.按Se计）：称取硒代半胱氨酸（5.3.1)21.2mg（精确至0.01mg），置于10mL容量瓶中，用0.5mL甲酸（5.1.2）溶解后，用水稀释并定容至刻度.于0℃~4℃C 储存，有效期1个月，5.4.2甲基晒代半胱氨酸标准储备液（1000mg/L.按Se计）：称取甲基硒代半胱氨酸（5.3.2）23.1mg（精确至0.01mg），置于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度.于0C～4℃储存，有效期1个月.5.4.3硒代蛋氨酸标准储备液（1000 mg/1.按Se计)：称取晒代蛋氨酸（5.3.3)24.8mg（精确至0.01mg），置于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，于0℃～4℃储存，有效期1个月.5.4.4混合标准中间液（1.0mg/L）：分别准确量取0.10mL标准储备液（5.4.1、5.4.2、5.4.3）于 100mL容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，现用现配.中，用水稀释并定容至刻度，现用现配.5.5材料5.5.1针式滤膜：水系，0.22xm.5.5.2超滤离心管：5mL/3kD.配15mL外管，或性能相当者.
6仪器设备
6.1液相色谱-串联质诺仪：配有电喷雾离子源.6.2分析天平：感量0.000 01 g、0. 000 1 g和0 01g.6.3pH计：精确至0.1.6.4涡旋混合仪.6.5恒温振荡器.6.6高速匀浆机：转速不低于15000r/min. 6.7高速离心机：转速不低于12000r/min.6.8网筛：孔径425μm6.9试样制备设备：匀浆机、高速粉碎机.
7分析步骤
7.1试样制备
7.1.1鲜样
食用菌样品取样部位按GB2763的规定执行，取不少于1000g样品放置于匀浆机中匀浆均匀，于-18C密封保存备用.
7.1.2干样
取不少于200g食用菌干样，放置于高速粉碎机中粉碎，过网筛（6.8)，制成待测样，于常温密封保存备用.
