B 41 ICS 11.220
NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3072-2017
禽结核病诊断技术 Diagnostic techniques for avian tuberculosis
2017-06-12发布2017-10-01实施 中华人民共和国农业部发布
NY/T3072-2017
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由农业部兽医局提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中国兽医药品监察所。
本标准主要起草人:朱良全、丁家波、蒋卉、毛开荣、彭小薇、王楠、徐磊、张磊。
NY/T 3072-2017
引言 禽结核病(avian tuberculosis)是由禽分枝杆菌种禽型分枝杆菌亚种感染引起禽的一种慢性传 染病。
该病呈世界性分布,多呈散发性。
该病主要通过消化道和呼吸道感染,呈慢性经过,渐进性消瘦、贫 血、鸡冠萎缩、跛行以及产蛋减少或停止。
潜伏期2个月至1年,病禽因衰竭或肝破裂而突然死亡。
无 明显的季节性和地区性。
该病主要特征是禽类肝、牌和肠道等组织器官形成肉芽肿和干酪样结节。
其列为非法定报告动物疫病,我国定为三 旦传人养禽场,则长期存在,很难根除。
类动物疫病。
术》(GB/18645-结核病检验检疫技术规范》
和国兽用生物制品规程(201人民共和国兽药典三部 (2010版)》、《OIE陆生动物手册(2014版)》中2.03.06章相关售同内外发表的相关研究 报告。
M PCR方法检测活禽分泌物 禽结核病诊断主要依赖负于组织样品中禽分枝杆菌分离、皮内变态反应及分为4个亚种,包括禽型 或排泄物中IS901IS12455DnaJ等基因片段。
关于禽结核分枝杆菌种,它可ubsp-Hominissuis)、林鸽 分枝杆菌亚种(Mavumsubsp.Avum)人猪型分枝杆菌亚种(Maiumsu种(Mavium 型分枝杆菌亚种Mavium dvaticum)核分枝黄亚 subsp.Paratuberculosis其中,禽型分枝杆菌亚种主要引起禽结核病。
而对于PCR方法,IS901基因 菌亚种及林鸽型分枝杆菌亚种;IS1245是禽结核分枝杆菌 4个亚种中均含有的片段种动物及人的禽分枝杆菌复合体成员[含禽结核分枝 杆菌种、人/猪型分枝杆面e)所含有的片段 c R ENTER G
Ⅱ
NY/T3072-2017
禽结核病诊断技术
1范围 本标准规定了禽结核病临床诊断、病原分离与鉴定、病原核酸检测及免疫学检测的诊断技术方法和 试验程序。
本标准适用于禽结核病的诊断、监测和检疫。
皮内变态反应不适用于野鸡、火鸡、水禽等其他禽类。
2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件。
GB19489实验室生物安全通用要求 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。
EDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid)。
IU:国际单位(internationalunits)。
PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)。
PPD:提纯蛋白衍生物、提纯结核菌素(purifiedprotein derivative)。
4生物安全要求 在样品采集、样品处理、检测及废弃物处理过程中,应注意人员防护。
其所涉及的实验操作,应按 GB19489的有关规定执行。
5临床诊断 5.1临床症状 以病禽消瘦、贫血、受侵器官组织结核性结节等为主要特征。
病禽表现胸肌萎缩、胸骨突出或变形, 冠、肉髯苍白。
如果关节和骨髓发生结核,可见关节肿大、跛行;肺结核病禽可见呼吸困难;肠结核可引 起严重腹泻。
5.2病理变化 5.2.1特征性病变 在肠道、肝和脾上形成不规则的灰黄色或灰白色大小不等的结节,切开后可见结节外面有一层包 膜,包有黄白色干酪样物;不同大小的结节,有时融合成一个大的结节,在外观上呈瘤样轮廓。
5.2.2病理组织学检查 发病初期,结节中心为变质性炎症,其周围被渗出物浸润,结节的外围是淋巴样细胞、上皮样细胞和 朗罕氏多核巨细胞。
当病程进一步发展,中心形成干酪样坏死。
6实验室诊断 6.1细菌学检查
NY/T 3072-2017 6.1.1仪器与耗材 Ⅱ级生物安全柜、恒温培养箱(40℃~42"C)、冰箱(2℃~8℃,-20℃)、4C离心机、生物显微镜、剪 刀、镊子、载玻片、接种环、染色盒等。
6.1.2试剂 6.1.2.1除特别规定外,所用化学试剂均为分析...