ICS11.220 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T27535—2011 猪流感HI抗体检测方法 Detection method of hemagglutination inhibition antibody against swine influenza 2011-11-21发布 2012-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T27535—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由中华人民共和国农业部提出. 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口， 本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所. 本标准主要起草人：乔传玲、杨焕良、陈艳、辛晓光、陈化兰. GB/T27535—2011 猪流感H抗体检测方法 1范围 本标准规定了猪流感病毒血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的技术要求. 本标准适用于猪流感血清HI抗体的检测. 2仪器 水浴箱、4℃冰箱等. 3试验材料 单道及多道微量移液器、吸头. 4试剂 4 10.01mol/LpH7.2PBS(参见附录A中A.1). 4.2胰酶溶液（参见附录A中A.2). 4.30.01mol/LKI04溶液（参见附录A中A.3). 4.41%丙三醇盐水（参见附录A中A.4). 4.5阿氏(Alsevers)液（参见附录A中A.5). 4.60.5%鸡红细胞悬液（参见附录A中A.6) 4.7HI试验抗原和阴、阳性血清（参见附录A中A.7). 5血凝(HA)试验 5.1用多道微量移液器在微量反应板的1~12孔均加人0.05 mL PBS 换吸头， 5.2吸取0.05mL抗原，加入第1孔，反复抽打3~5次混匀. 5.3从第1孔吸取0.05mL抗原加人第2孔，混匀后吸取0.05mL加入第3孔，如此进行对倍稀释至 第11孔，从第11孔吸取0.025mL弃之，换吸头.第12孔作为红细胞对照. 5.4每孔均加人0.05mL0.5%(体积分数)鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）. 5.5轻轻混匀，室温(20℃~25℃)下静置20min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下）， 对照孔红细胞显著呈钮扣状时判定结果. 5.6结果判定：将反应板倾斜45°，观察红细胞若没有呈泪滴状流消，则判为HA阳性；完全血凝（不流 消)的病毒最高稀释倍数代表1个血凝单位(HAU). 6血凝抑制(H)试验 6.1操作步骤 6.1.1血清样品的处理：待检血清样品需经“胰酶-加热-高碘酸盐方法”处理，以去除血清中非特异性 1 ...
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