C53 ICS 67.040 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.212-2008 贝类中腹泻性贝类毒素的测定 Determinationofdiarrheticshellfishpoisoninshellfish 2008-11-21发布 2009-03-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 数码防伪 中国国家标准化管理委员会
GB/T5009.212-2008 前言 本标准修改采用日本厚生省环乳第37号通知《腹泻性贝类毒素检验方法》。
本标准与日本厚生省方法相比主要差异为： 增加了“规范性引用文件”、“术语和定义”； -增加了“仪器和设备”； 一对“试样保存与制备”、“试剂和材料”进行了修改； 一在“结果判断及表述"规范了结果表述方式。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。
本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国云南出人境检验检 疫局。
本标准主要起草人：曹际娟、王秋艳、于杰、于兵、黄大亮、孙哲平、宋惠君、郑惠芳、丁健、薛忠良、 徐维加、郑秋月。
GB/T 5009.212-2008 贝类中腹泻性贝类毒素的测定 1范围 本标准规定了贝类及其制品中腹泻性贝类毒素的测定方法。
本标准适用于贝类及其制品中腹泻性贝类毒素的测定。
2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后 的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB14925实验动物环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。
3. 1 腹泻性贝类毒素diarrhetic shellfishpoinson;DSP 以大田软海绵酸（okadaic acid,OA)及其衍生物为代表、摄食后可产生以腹泻为主要特征的存在于 贝类体内的海洋生物毒性物质的总称。
3.2 鼠单位mouse unit；MU 对体重为16g～20g的三只雄性ICR小鼠腹腔各注射1mL贝类毒素提取液后，使两只或三只小 鼠在24h内死亡的最低毒素量定义为一个鼠单位。
4原理 用丙酮提取贝类中DSP毒素，经乙醚分配后，经减压蒸干，再以含1%吐温-60的生理盐水为分散 介质，制备DSP-1%吐温-60生理盐水混悬液，将该混悬液注射人小鼠腹腔，观察小鼠存活情况，计算其 毒力。
5试剂和材料 除非另有规定，本标准所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。
5.1丙酮(CHO)。
5.2无水乙醚(CHnoO)。
5.31%吐温-60的生理盐水：称取1.0g吐温-60（CgH12sO2s），溶于生理盐水（0.85%氯化钠）中，并 定容至100.0mL。
6仪器和设备 6.1旋转蒸发器。
6.2圆底烧瓶：500mL、250mL、100mL、50mL。
6.3均质器。
GB/T 5009.212-2008 6.4布氏漏斗。
6.5天平：感量0.1g。
6.6带塞刻度试管：15mL，具0.2mL刻度。
6.7分液漏斗。
6.8冰箱。
6.9一次性注射器：1mL。
6.10小白鼠：体重为16g～20g的健康ICR品系雄性小鼠。
7试样保存和制备 7.1样品的保存 7.1.1样品应有充分的代表性。
去壳贝肉、带壳贝类或罐装贝类样品等，均应采取足够的数量并使贝 肉达400g以上。
7.1.2不能及时送检的样品，除可常温保存的样品外，应将样品置于合成树脂袋内冷冻送检。
如为带 壳样品，应按7.2的方法开壳，去除水分后冷冻送检。
7.2样品的制备 7.2.1生鲜带壳样品的前处理 用清水彻底洗净贝类外壳，切断闭壳肌，开壳，用清水淋洗内部去除泥沙及其他异物，取出贝肉。
严 禁以加热或药物方法开壳。
注意不要破坏闭壳肌以外的组织，尤其是中肠腺（又称消化盲囊，组织呈暗 绿色或褐绿色）。
将去壳贝肉放在孔径约2mm的金属筛网上，沥水5min，按7.2.3制备检样。
7.2.2冷冻样品的前处理 在室温下使冷冻样品融化呈半冷冻状态。
带壳冷冻的样品按7.2.1方法清洗、开壳、淋洗取肉，此 时的贝肉仍呈冷冻状态，除去贝肉外部附着的冰片，用吸水纸轻轻抹去水分后，按7.2.3制备检样；事先 已去除水分的冷冻去壳样品，室温融化后，按7.2.3制备检样。
7.2.3检样制备 肠腺称重后作为检样备用，注意不要使中肠腺内容物污染制样工具；不便切取中肠腺的贝类样品，称量 200g贝肉后，可将全部贝肉细切后混合，作为检样。
8检验...
