NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1858.5-2010
番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第5部分:番茄抗疮病鉴定技术规程
Rulesfor evaluation of tomato forresistance to diseasesPart5:Rulefor evaluation of tomato forresistance to bacterial scab
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1858-2010《番茄主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准,共8部分:
一第1部分:番茄抗晚疫病鉴定技术规程;第3部分:番茄抗枯萎病鉴定技术规程; 第2部分:番茄抗叶霉病鉴定技术规程;第4部分:番茄抗青枯病鉴定技术规程;第5部分:番茄抗疮瘫病鉴定技术规程;一第6部分:番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程: 第7部分:番茄抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程;第8部分:番茄抗南方根结线虫病鉴定技术规程.本部分为NY/T1858-2010的第5部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所. 本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口.本部分主要起草人:谢丙炎、冯兰香、杨宇红、杨翠荣、龚惠芝.
第5部分:番茄抗疮疝病鉴定技术规程 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程
1范围
本部分规定了番茄抗疮痴病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件和试验设计、接种、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格.
本部分适用于裁培番茄(Solanum/ycopersicumL.)自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生番茄和番茄近缘种对番茄疮疝病抗性的室内苗期鉴定和评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1
番茄疮痴病Tomatobacterialscab
由甘蓝黑腐黄单胞菌疮痴致病变种[Xanthomomas campestris pw.wesicatoria(Doidge)Dye]引|起.叶片产生近圆形、褐色坏死斑,病斑边缘具窄而褪绿的晕环.茎部形成暗褐色、不规则、稍隆起、疮痴状的病斑;青果易出现暗褐色、近圆形、本栓化的粗糙枯死斑,严重时,病斑相连为不规则形的大块疮痴.
病原分离物pathogenicisolate
采用人工方法分离获得的病原物的纯培养物.
2.3
生理小种physiological race
病原物种内或专化型内在形态上无差异,但在寄主植物的品种上具有显著致病性差异的类群.
鉴别寄主differential host
用于签定和区分特定病原物的生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种、品系或材料.
2.5
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主植物和引起病变的能力.
2.6
可以使病原物生长的、自然的或人工配制的基质,
用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
2. 8
接种悬浮液inoculum suspension
用于接种的含有定量接种物的液体.
NY/T1858.52010
2.9
人工接种artificial inoculation
在适宜条件下,通过人工操作将接种体置于植物体的适当部位并使之发病的过程.
病情级别disease rating scale
人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2. 11
)asa更 通过对植株个体发病程度(病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.
抗病性disease resistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可造传性状.
2.13
抗病性鉴定evaluation of disease resistance
通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平.
2.14
抗性评价evaluationofresistance
根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述.
3接种体制备
3.1病原物分离
用常规组织分离法,从番茄疮癫病的叶部病现上分离病原物.分离物经培养性状、菌体形态特征及生理生化反应等鉴定,确认为甘蓝黑腐黄单胞菌疮瘤致病变种后,再进行分离物纯化和致病性测定,并保存备用.
3.2生理小种鉴定
对用于抗病性鉴定接种的病原分离物进行生理小种鉴定,鉴定方法参照附录A的A.2.
3.3接种体繁殖和保存
3.3.1接种体繁殖
蒸馏水配成细菌浓度约为3X10cfu/mL.的接种悬浮液. 挑取一接种环保存的疮痴病病菌,在NA培养基的平板上划线,置30C下培养36h~48h,用灭菌
NA培养基的制备:牛肉浸膏3g,蛋白陈8g.蔗糖或葡萄糖10g,酵母浸膏1g,琼脂17g~20g,加蒸馏水至1000mL.先将琼脂加热熔化于大部水中,再将其余各成分用少量水化开加人,调节pH至7.0,分装,高压灭菌(121°℃.20min).
3.3.2接种体保存
将NA培养基上的新鲜疮痴病菌转移到保存培养基斜面上,30C下培养48h后,置4C下保存.
保存培养基的制备:酵母浸膏10g,D-葡萄糖20g,碳酸钙20g,琼脂12g,蒸馏水1000mL,先将除碳酸钙外的其他成分加热溶解,然后加碳酸钙,调节pH至7.2.分装和高压灭菌(121℃,20min).
4鉴定条件和试验设计
4.1鉴定室
苗期抗病性鉴定的鉴定室能够人工调节室内温度、湿度和光照,使之具备良好的发病环境.
鉴定材料随机排列或顺序排列,每份鉴定材料重复3次,每一重复10株苗.
4.3鉴定对照材料
设“画春”或"Moneymaker"番茄为感病对照品种,“Hawai7998"番茄为抗病对照品种.
4.4鉴定材料育苗
鉴定材料种子经10%次氯酸钠溶液浸种10min,清水冲洗后置于恒温培养箱中28℃催芽,播种于育苗筐内.育苗基质为草炭、蛭石和菜田土(2:1:1),经高温蒸汽灭菌(134C,30min).在日光温室里育苗,室内温度为18℃~25℃,幼苗应生长健壮、一致.
5接种
5.1接种时期
幼苗在4~5片真叶期进行接种.
5.2接种方法
采用喷雾法接种,即用小型喷雾器将配制好的接种悬浮液均匀地喷雾到每一叶片的正反面,以不形成水滴流淌为度.
5.3接种后的管理
接种后室内白天温度为24℃~28"C,夜间为20℃~24℃,最初36h~48h内的RH为100%,以后为80%~95%,每天光照12h~14h,强度为35klx,正常裁培管理.
6病情调查
6.1病情级别划分
幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表1.
表1番茄疮癌病病情级别的划分
病情级别 0 无症状 症状描述1 0<病斑面积占叶片面积<10%2 10%≤病班面积占叶片面积<25%3 4 25%≤病班面积占叶片面积<50% 50%≤病斑面积占时片面积<75%75%≤疯斑面积占叶片面积≤100% 6.2调查时间 接种后8d~12d进行. 6.3病情记载 调查记载每一鉴定植株的病情级别,并计算病害严重等级. 病害严重等级按公式(1)计算: ∑(s×n)DSR = N (1) 式中: DSR- 病害严重等级; 各病情级别的代表数值;n 各病情级别的植株数;N调查总植株数.