NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T1858.7-2010
番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第7部分:番茄抗黄瓜花叶病毒病 鉴定技术规程
Rules for evaluation of tomato forresistance to diseasesPart 7:Rule for evaluation of tomato for resistance to cucumber mosaic virus
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1858-2010《番茄主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准,共8部分:
第1部分:番茄抗晚疫病鉴定技术规程;一第2部分:番茄抗叶霉病鉴定技术规程;第3部分:番茄抗枯萎病鉴定技术规程; 一第4部分:番茄抗青枯病鉴定技术规程;一第5部分:番茄抗疮瘫病鉴定技术规程;第6部分:番茄抗番茄花叶病毒病鉴定技术规程:一第8部分:香茄抗南方根结线虫病鉴定技术规程. 第7部分:番茄抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程;本部分为NY/T1858-2010的第7部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口.本部分主要起草人:谢丙炎、冯兰香、杨宇红、杨翠荣、龚惠芝. 本部分起草单位:中国农业科学院蔬莱花卉研究所.
番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第7部分:番茄抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程
1范围
本部分规定了番茄抗黄瓜花叶病毒病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件和试验设计、接种、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格.
本部分适用于裁培番蕴(SolanumLycopersicumL)自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生番茄和番茄近缘种对黄瓜花叶病毒病抗性的室内苗期鉴定和评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1
黄瓜花叶病毒病Cucumbermosaievirus
形和扭曲,甚至变狭窄最后成为蕨叶状或细长的鞋带状.果实少面小、畸形.重病株黄绿色,枝条丛生, 由黄瓜花叶病毒(Cucwmbermosaictirus,CMV)引起的番茄病毒病.病株呈现系统花叶,病叶畸严重矮化.
2.2
病原分离物pathogenicisolate
采用人工方法从植物发病部位分离获得的病原物的纯培养物.
2.3
株系strain
同种病毒中不同来源的、血清学相关的,但生物学性状不完全相同,或对不同寄主植物及不同品种具有致病力差异的变异类群.
2. 4
鉴别寄主diagnostiehost
用于鉴定和区分特定病原物生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种、品系或材料.
2.5
致病性pathogenicity
病原物所具有的破坏寄主植物和引起病变的能力.
2.6
用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
接种悬浮液inoculum suspension
用于接种的含有定量接种体的液体.
2.8
人工接种artificial inoculation
NY/T 1858.7-2010
在适宜条件下,通过人工操作将接种体置于植物体的适当部位并使之发病的过程.
病情级别disease rating scale
人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2. 10
病情指数disease index(DI)
抗病性disease resistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
2.12
抗病性鉴定evaluation of disease resistance
通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平.
2.13
3接种体制备
3.1病原物分离
从发病植株的典型病叶上以常规汁液摩擦法分离黄瓜花叶病毒病病原物.分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主、理化性状及传播方式测定,电子显微镜观察病毒粒子形态等方法鉴定,确认为黄瓜花叶病毒后,再进行分离物纯化和致病性测定,保存备用.
3.2株系鉴定
对用于抗病性鉴定接种的病毒分离物首先进行株系鉴定,鉴定方法参照附录A的A.2.
3.3接种体繁殖和保存
3.3.1接种体繁殖
取少量保存的黄瓜花叶病毒供试株系的鲜病叶摩擦接种在“丽春”或“Moneymaker”番茄叶片上,置防虫湿室内,在26℃~28C条件下培育7d~10d后采收病叶,1g鲜病叶加30ml的0.03mol/L磷酸盐缓冲液(pH8.0)匀浆,纱布过滤或3000r/min离心15min,其滤液或上清液为接种悬浮液.
3.3.2接种体保存
接种体可常年保存在防虫温室内的枯斑三生烟(Nicotianatabacumcvs.SamsunNN)或珊西NC烟(Ncvs.XanthiNC)上,或将鲜病叶制作成冻干叶保存在一20℃以下的冰箱内.
冻干叶的简易制作法:将鲜病叶剪成小块,在吸水纸上均匀地铺放一层,可照此连续铺放数层,但各换一次干燥剂,以后每两天更换一次,直到碎病叶彻底干燥,整个制作过程应防止其他病毒的污染. 层吸水纸之间应用硅胶或氯化钙隔开,然后置于密封的容器里,再将容器置于4C冰箱.头两天每天更
4鉴定条件和试验设计
4.1鉴定室
苗期人工接种鉴定室是可调节温度和光照的防虫日光温室,使之具备良好的发病环境.
鉴定材料随机排列或顺序排列,每份鉴定材料重复3次,每一重复10株苗.
设“丽春”或“Moneymaker"番茄为感病对照;目前尚未发现理想的抗病对照番茄,LA0458品系比较抗病,可试用.
4.4签定材料育苗
苗筐内,育苗基质为草炭、蛭石和菜田土(2:1:1),基质经高温蒸汽灭菌(134℃,30min),在日光温室 鉴定种子在10%磷酸三钠溶液中浸泡15min,清水冲洗后置于恒温培养箱中28C催芽,播种于育里育苗.室内温度18℃~25℃,幼苗应生长健壮、一致.
5接种
5.1接种时期
幼苗在1~2片真叶期进行接种.
5.2接种方法
接种前将番茄幼苗黑暗处理一昼夜,再在叶面上撒适量600目金刚砂.少量鉴定可采用摩擦接种法,即充分洗净的手指蘸取接种悬浮液,在叶面轻度摩擦造成微伤,每株接种第1~2片真叶;大量整定 采用喷枪接种法,即喷枪的杯内盛接种悬浮液,喷枪嘴距叶片约2cm,空气压缩机压力为205.89kPs~245.1kPs.接种后立即用清水冲洗叶面上多余的病毒汁液.无论采用何种接种方法,通常接种两次,间*P S~P
5.3接种后的管理
光照,正常栽培管理. 接种当天的室内温度为26℃~30℃,以后白天温度尽量控制在24℃~30℃,夜间不低于20℃,常规
6病情调查
6.1病情级别划分
幼苗病情级别及其相对应的症状描述见表1.
表1黄瓜花叶病毒引起的番茄病毒病病情级别的划分
病情级别 0 无症状 症状措述1 心叶的叶脉为明脉,1~2片真叶呈现花叶3 中上部叶片花叶5 7 多数叶片花叶,少数叶片畸形或明显皱缩 多数叶片重花叶,部分叶片畸形、细长:植株明显矮化9 几乎叶片重花叶,多数叶片畸形、廉叶:植株严重矮化,甚至枯死
6.2调查时间
接种后约21d进行.
6.3病情记载
调查记载每一鉴定植株的病情级别,并计算病情指数.
病情指数按公式(1)计算:
∑(s×n)DI = NXS ×100 ..(1)
式中:
DI--病情指数;
3-各病情级别的代表数值;
n各病情级别的植株数;