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中华人民共和国农业行业标准
Techniqual code ofpractice forresistance evaluation ofwheat to take-all disease
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口.
本文件起草单位：中国农业科学院植物保护研究所.
本文件主要起草人：刘太国、张吴、刘博、高利、陈万权.
小麦全蚀病抗性鉴定技术规程
11范围
本文件规定了小麦全蚀病抗性鉴定的鉴定程序、接种体制备、抗病性鉴定、病情调查、抗性评价、等技术要求.
本文件适用于普通小麦（包括选育品种/系、地方品种、特殊遗传材料、近等基因系、重组自交系、DH群体）、杂交小麦、其他栽培小麦种、野生小麦、小麦野生近缘种对小麦全蚀病抗性的田间鉴定和评价.
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件.
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
小麦全蚀病wheat take-all
由Gaeumammomyces graminis（Sacc.）Arx&.Oliver 引起的典型小麦根部病害，病原菌有3个变种，禾顶囊壳小麦变种G.graminisvar.tritici、禾顶囊壳禾谷变种G.graminisvar.graminis和禾顶囊壳燕麦变种G.graminisvar.aoenae，在小麦品种抗全蚀病鉴定与评价中通常选用禾顶囊壳小麦变种G.graminis var.tritici 进行接种.
3. 2
变种pathovar
病原在“种”下类群中在形态特征、对不同寄主的致病性、生理生化及某些遗传特征上有差异的群体.
4鉴定程序
性评价和抗性评价阶段，程序流程如图1所示. 小麦全蚀病抗性鉴定程序包括接种体制备、鉴定选择、接种方法、严重度记载及标准、苗期或成株期抗
5接种体制备
5.1病原物分离
1%的硝酸银溶液表面消毒 30s，置半量马铃薯葡萄糖琼脂（potato dextrose agar PDA）培养基平板上 通常采用组织分离法从小麦全蚀病发病部位分离病原物.从发病小麦根部或茎基部切取病组织，用19℃、12h光周期条件下进行培养（3d~16d），分离物经形态学特征鉴定，确定为小麦全蚀病菌后，进行分离物纯化，经致病性测定后，转至PDA斜面培养基，直接保存或用石蜡封存于4C条件下备用.
5.2病原物接种体的制备
将鉴定为G.graminis var.tritici 的菌株按附录A中A.2的方法制成接种体备用.
6抗病性鉴定
6.1苗期鉴定
6.1.1小麦幼苗培养
选择籽粒饱满健康的待测小麦种子，2%次氯酸钠溶液中表面漂洗消毒2min，蒸馏水中漂洗3次，置于培养ⅢL中吸足水的3层滤纸上室温（25土3）C萌发24h~48h，备用.
图1小麦全蚀病抗性鉴定程序流程
6.1.2接种方法
6.1.2.1试管法
取尖底、透明、容量15mL塑料离心管，长115mm，直径15mm，底部有排水孔，用棉球堵住排水孔，装蛭石至9mL处，接人在PDA上培养2周～3周、菌落边缘处选取的菌饼（直径为13mm），再加2cm~2.5cm蛭石，将萌发48h的待测品种种植于管内，每管3粒，再覆盖1cm蛭石，将试管捆好、固定于直立试管架上，灌水，18℃培养，每周每管浇人10mL（体积比1：3）的霍格兰氏大量元素溶液，28d后，清洗植株根部，去除蛭石，调查发病情况.鉴定试验设3次～4次重复，每个重复30株.
6.1.2.2盆栽法
取方底或圆底、底部渐细、容量800mL的塑料盆，装入体积比2：1的营养土：蛭石混合物400mL.加人病麦粒或病谷粒（粉碎成0.2mm~0.5mm颗粒）与蛭石混合物（体积比≥0.5%）1cm或2cm（40mL/盆或80mL/盆），再加人前述营养土蛭石混合物至700mL，灌水至75%土壤含水量，将5粒~10粒萌发种子分散播种，覆土15mm，将花盆置于18C培养28d，每5~7d灌水1次.28d后小心取出植 株，清洗根部，去除泥土或蛭石，调查发病情况.鉴定试验设3次～4次重复，每个重复30株.
6.2成株期人工病圈设置和接种方法
病圃小区睡宽150cm，每鉴定材料种植1行，行长10cm，行距33cm，每隔20个品种设1个感病对照（小6号或其他本地高感品种）.随机排列，重复3次.开沟后，先均匀播撒玉米砂培养基培养的15g接种体，然后播种3g~5g小麦种子覆土，正常田间管理.鉴定圃内不施用任何杀菌剂.
