中华人民共和国国家标准
转基因植物及其产品成分检测 耐除草剂玉米DBN9858转化体特异性 PCR方法
Event-specificPCRmethod for herbicide-tolerantmaize DBN9858 Detectionofgeneticallymodifiedplants andderivedproducts-
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国农业农村部提出.
本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.
本文件起草单位:中国农业科学院生物技术研究所、农业农村部科技发展中心、天津市农业科学院种质资源与生物技术研究所、北京大北农生物技术有限公司.
本文件主要起草人:苗朝华、梁晋刚、檀覃、金芜军、高芳瑞、董美、郑戈、宛煜嵩、王永、兰青阔、汤波、文婷婷.
转基因植物及其产品成分检测 耐除草剂玉米DBN9858转化体特异性PCR方法
1范围
本文件规定了耐除草剂玉米DBN9858转化体特异性PCR定性和定量检测方法.本文件适用于玉米及其制品中DBN9858转化体成分的定性和定量检测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文本文件.
农业部1485号公告-4-2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化农业部1861号公告-3-2012转基因植物及其产品成分检测玉米内标准基因定性PCR方法NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求
3术语和定义
农业部1861号公告一3-2012界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
3.1
耐除草剂玉米 DBN9858转化体特异性序列event-specific sequence of herbicide-tolerant maize DBN9858
耐除草剂玉米DBN9858转化体的外源插人片段5'端或(和)3端与玉米基因组的连接区序列,包括玉米基因组部分序列及转化载体T-DNA部分序列.
3.2
阳性质控品positive control
用于质量控制的阳性样品,分为用于定性检测的阳性定性质控品和定量检测的阳性定量质控品.注:阳性质控品宜优先选用有证标准物质,也可使用经充分验证的实验室配制样品.阳性定性质控品的转基因含量为0.1%~1.0%,阳性定量质控品的转基因含量值宜与标识阔值相当.
3. 3
校准品calibrator
用于绘制标准曲线的梯度稀释样品,用纯合转化体基因组DNA或转基因含量较高的有证标准物质或阳性样品稀释制备,确认后至少含5个有效浓度.宜优先选择有证标准物质.
3. 4
子样subsample
试样预处理后,从同一试样不同位置随机抽取的独立样品.
3.5
ACr值ACr value
实时荧光PCR扩增中样品转化体特异性序列平均C值与内标准基因平均C值的差值.
△ACr值AACtvalue
实时荧光PCR扩增中试样的△C值与阳性定量质控品的△C值的差值.