中华人民共和国国家标准
代替GB 31656.3-2021
GB 31656.3-2025
食品安全国家标准水产品中环 丙沙星、恩诺沙星、喹酸、氟甲喹 残留量的测定高效液相色谱法
National food safety standardDetermination of ciprofloxacin enrofloxacin oxolinic acid and flumequineresidues in aquatic products by high performance liquid chromtography
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
残留量的测定高效液相色谱法》，与GB31656.3-2021相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变 本文件代替GB31656.3-2021水产品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、恶座酸、氟甲喹化如下：
a）删除了定量限不满足限量要求的诺氟沙星和氧氟沙星.
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：
GB 31656.3-2021:
一本文件为第一次修订.
食品安全国家标准 水产品中环丙沙星、恩诺沙星、喹酸、氟甲喹残留量的测定 高效液相色谱法
1范围
本文件规定了水产品中环丙沙星、恩诺沙星、恶喹酸、氟甲喹残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法，
本文件适用于鱼类肌肉和皮等可食组织，虾、蟹、贝类的可食组织中环丙沙星、恩诺沙星、隆酸、氟甲喹残留量的检测.其他水产品的检测可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T30891-2014水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试料中残留的环丙沙星、恩诺沙星、恶喹酸、氟甲喹，经酸化乙睛提取，正已烷脱脂，C固相萃取柱净化，液相色谱-荧光检测法测定，外标法定量.
5试剂与材料
除另有规定外试剂均为分析纯水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.2甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.3正己烷（CH）：色谱纯.5.1.4盐酸（HCI). 5.1.5磷酸（H PO).5.1.6氨水（NHHO).5.1.7氢氧化钠（NaOH）.5.1.8二水合磷酸二氢钠（NaHPO2HO）.5.1.9无水硫酸钠（Na:SO）.5.1.10四丁基溴化铵（CHBrN）.
环丙沙星、恩诺沙星、恶喹酸、氟甲喹：含量≥98.0%，详见附录A.
5.3溶液配制
GB 31656.3-2025
5.3.1盐酸溶液：取盐酸50mL.加水稀释至100mL，混匀.5.3.2磷酸溶液：取磷酸1mL.加水稀释至10mL.混匀.5.3.3酸化乙晴溶液：取乙睛250mL.加盐酸溶液2mL，充分混匀.5.3.4乙晴饱和正已烷溶液：取正已烷200mL于250mL分液漏斗中，加适量乙晴后，刷烈振摇，待分配5.3.50.1mol/L.盐酸溶液：取盐酸9mL.用水稀释至1000mL. 平衡后，弃去乙晴层，即得.5.3.60.1mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4g.用水溶解并稀释至1000ml.5.3.70.05mol/L磷酸盐缓冲溶液：取二水合磷酸二氢钠1.56g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79mL溶解，用水稀释至200ml.5.3.80.01mol/L四丁基澳化铵溶液（pH3.0)：取四丁基溴化铵3.22g加水900mL.使溶解，用磷酸溶5.3.9洗脱液：取氨水25mL.用甲醇稀释至100ml. 液调节pH到3.0，用水稀释至1000mL.
5.4标准溶液制备
5.4.1环丙沙星、恩诺沙星标准储备液（100μg/mL）：取环丙沙星、恩诺沙星各约10mg，精密称定，用甲醇溶解并稀释定容至100mL棕色容量瓶中，摇匀，即得.一18C以下避光保存，有效期6个月.5.4.2喹酸、氟甲喹标准储备液（100μg/mL）：取恶喹酸、氯甲喹各约10mg，精密称定，用0.1mol/L氢氧化钠溶液10mL使溶解，加乙晴稀释定容至100mL棕色容量瓶中，摇匀，即得.-18℃以下避光保5.4.3混合标准工作液（10μg/mL）：精密量取环丙沙星、恩诺沙星、恶喹酸、氟甲喹标准储备液各1mL， 存，有效期6个月.于10mL棕色容量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为10pg/mL混合标准工作液.4℃C以下避光保存，有效期1个月.
5.5材料
C固相萃取柱：500mg/3mL，或相当者.
6仪器和设备
6.1高效液相色谱仪：配荧光检测器.6.3氮吹仪.6.5均质器：15000r/min.6.8梨形瓶：100mL.6.9分液漏斗：250mL.6.11分液漏斗振摇器.
6.2分析天平：感量0.00001g和0.01 g-6.4超声波振荡器.6.6离心机：4000r/min.6.7尼龙微孔滤膜：0.22m.6.10旋转蒸发器.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
按GB/T30891-2014中附录B的要求制样.a）取均质的供试样品，作为供试试样；b）取均质的空白样品作为空白试样；
