中华人民共和国国家标准
GB 31659.13-2025
食品安全国家标准 禽蛋中阿维菌素类药物残留量 的测定液相色谱-串联质谱法
National food safety standard-Determination of avermectins residues in eggs by liquidchromatography-tandem mass spectrometric method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 禽蛋中阿维菌素类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了禽蛋中阿维菌素类药物残留量检测的制样和液相色谱-申联质谱测定方法.本文件适用于禽蛋中阿维菌素Bla.22，23-二氢阿维菌素Bla、多拉菌素、乙酰氨基阿维菌素Bla和莫昔克丁残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
定量. 试样中残留的阿维菌素类药物经酸化乙提取，固相萃取柱净化，液相色谱-申联质谱法测定，外标法
5试剂和材料
水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.2甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.3乙酸铵（CHCOONH）：色谱纯.
5.2溶液配制
5.2.11%甲酸乙睛溶液：取甲酸10mL.用乙晴稀释至1000mL，混匀.5.2.20.1%甲酸乙晴溶液：取甲酸1mL.用乙精稀释至1000mL混匀. 5.2.3含10mmol/1.乙酸铵的0.1%甲酸水溶液：取乙酸铵0.77g.用适量水充分溶解，加入甲酸1mL后，加水稀释至1000ml混匀，现用现配.5.2.450%乙晴水溶液：取乙晴500mL加水稀释至1000mL，混匀.
5.3标准品
95%，见附录A. 阿维菌素Bla、22.23-二氢阿维菌素Bla、多拉菌素、乙酰氨基阿维菌素Bla和莫昔克丁，含量均≥
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：取阿维菌素Bla、22，23-二氢阿维菌素Bla、多拉菌素、乙酰氨基阿维菌素Bla、莫昔克丁标准品适量（相当于各有效成分10mg），精密称定，用乙溶解并稀释定容于100mL容量瓶，配制成浓度为100μg/mL标准储备液，-18C以下避光保存，有效期3个月.
5.4.210μg/mL混合标准工作液：分别精密量取阿维菌素类药物的标准储备液各1mL，于10mL容量瓶
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中，用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的混合标准工作液.2C～8C避光保存，有效期1个月.5.4.31μg/mL混合标准工作液：精密量取10μg/mL混合标准工作液1mL.于10mL容量瓶中，用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为1μg/mL的混合标准工作液，现用现配.
5.5材料
5.5.1通过型亲水亲脂平衡固相萃取小柱：150mg/3mL，或相当者.5.5.2微孔尼龙滤膜：0.22μm.5.5.3盐析包：含4g氯化钠和1g无水硫酸镁.
6仪器和设备
6.2分析天平：感量0.000 01g和0.01g. 6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源，6.3离心机：转速不低于4000r/min.6.4组织匀浆机.6.5涡旋混合器.6.6振荡器.6.7氮吹仪.6.8固相萃取装置.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试禽蛋样品，洗净去壳，并均质.b）取均质后的空白样品作为空白试样： a）取均质后的供试样品，作为供试试样；c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试样.
7.2试样的保存
-18℃以下保存.
8测定步骤
8.1提取
称取试料（5士0.05）g于50mL离心管中，加人纯水5mL并涡旋混合30s后，准确加人1%甲酸乙睛溶液10mL，振荡15min.加人含4g氯化钠和1g无水硫酸镁的盐析包，涡旋1min，4 000r/min离心10min，取上层乙晴相，备用.
8.2净化
取备用液2mL至固相萃取小柱，流速控制在1mL/min~2mL/min，收集流出液，并用1mL乙晴淋洗固相萃取小柱，合并流出液和淋洗液，40C下氮气吹干.用50%乙晴水溶液1mL溶解残留物，超声1min，过0.22um微孔尼龙滤膜供液相色谱-串联质谱仪测定.
8.3基质匹配标准曲线的制备
10 μg/L、50μg/L、100μg/1.和250pg/L的基质匹配标准溶液，过滤后供液相色谱-串联质谱测定.以各药 精密量取标准工作溶液适量，用经提取和净化的空白试料溶液稀释配制浓度为1yg/L、5ug/L物定量离子色谱峰面积为纵坐标、基质匹配标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线.求回归方程和相关系数.
8.4测定
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