NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2622-2014
灰飞虱抗药性监测技术规程
Guideline for insecticide resistance monitoring of the small brown planthopper
中华人民共和国农业部发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由农业部种植业管理司提出并归口.本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学、江苏省植物保护站.本标准主要起草人：张绅、高聪芬、邵振润、张凯、张绍明、张巍、斑兰风.
灰飞虱抗药性监测技术规程
1范围
本标准规定了稻苗浸渍法监测灰飞虱[Laodelpha.xstriatellus（Fallen）]抗药性的方法.本标准适用于灰飞虱对杀虫剂的抗药性监测.
2试剂与材料
2.1生物试材
试虫：灰飞虱Laodelphax striatellus（Fallen）;供试植物：采用感虫水稻品种，如武育梗3号.
2.2试验药剂 原药.
2.3试验试剂TritonX-100（或吐温80）；丙酮（或二甲基甲酰胺）：所用试剂一般为分析纯.
3仪器设备
3.1电子天平（感量0.1mg）；3.2塑料杯（容量：350mL；上口直径：7cm，下口直径：5cm，高：10cm）；3.3养虫盒（规格：35cm×23cm×13cm）；3.4移液管（2mL）；3.5容量瓶（10mL、25mL）；3.6量筒（500mL);3.7烧杯（500mL); 3.8吸虫器：3.9移液器：3.10人工气候箱：温度（25±1）℃、湿度85%±10%、光照周期16h8h（L：D）.
4试验步骤
4.1试材准备
4.1.1试虫准备
选当地具有代表性的农田（如不同作物或品种）3块～5块，每块田随机选取5点用吸虫器等工具采集生长发育较一致的灰飞虱成虫或若虫，每地采集虫量1000头以上，供室内饲养.
4.1.1.2试虫饲养
无土种植的水稻上饲养，以室内饲养的F或F：代生理状态一致的3龄中期若虫供抗药性监测. 大田采集的成虫或若虫，在人工气候箱内（25士1)C、湿度85%±10%、光照周期16h：8h（L：D）
4.1.2试验水稻准备
NY/T 2622-2014
生长.6d后，将稻苗（一叶一心，苗高约6cm）分成30株一组，于阴凉处晾至根部无明水，供测试用.
4.2药剂配制
在电子天平上用容量瓶称取一定量的原药，用有机溶剂（如丙等，吡蚜酮用二甲基甲酰胺）溶解，加人终浓度0.1%TritonX-100（或0.1%吐温80）.用有机溶剂定容.加工成制剂.用移液管吸取一定 量的制剂加入塑料杯中，用蒸馏水稀释配制成一定质量浓度的药液供预备试验.根据预备试验结果，按照等比梯度设置5个~7个系列质量浓度.每质量浓度药液量不宜少于250mL.
4.3处理方法
4.3.1浸药
计浓度从低到高的顾序重复上述操作，每浓度处理3次以上重复，以含有与最高浓度药液等剂量的有机 将试验稻苗在配制好的药液中浸渍10s，取出沥至无水滴下，置于垫有滤纸的塑料杯中.按试验设溶剂的蒸馏水溶液作空白对照.
4.3.2接虫与培养
在室温晾30min后，用吸虫器将3龄中期若虫移人上述塑料杯中.每杯20头，杯口用保鲜膜封住并用3号昆虫针扎孔，然后转移至温度为（25±1）℃，相对湿度为85%士10%、光周期16h：8h（L：D）的人工气候箱中饲养和观察.
4.4结果检查
分别于处理后2d有机磷类、氨基甲酸酯类及拟除虫菊酯类）、4d（氯化烟酰类和苯基吡唑类）和5d（吡啶甲亚胺杂环类）检查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数.
5数据统计与分析
5.1计算方法
根据调查数据，计算各处理的校正死亡率，按式（1）和式（2）计算，计算结果均保留到小数点后两位：
式中：
K-表示死亡虫数，单位为头；N-表示处理总虫数，单位为头.
P-死亡率，单位为百分率（%）；
式中：
P-校正死亡率，单位为百分率（%）；
P.一处理死亡率，单位为百分率（%）；
P.一空白对照死亡率，单位为百分率（%）.
若对照死亡率20%，试验需重做.
5.2统计分析
采用SAS.POLO、PROBIT DPS.SPSS等软件进行统计分析，求出每种药剂的LC值及其95%置信限、b值及其标准误.
6抗性水平的计算与评估
6.1敏感毒力基线
2
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灰飞氮对部分杀虫剂的敏感毒力基线（参见附录A).
6.2抗药性水平的分级标准
抗药性水平的分级标准见表1.
表1抗药性水平的分级标准
抗药性水平分级 抗性倍数，倍中等水平抗性 低水平抗性 10. 0~<RR≤100. 0 5.0100.0
6.3抗药性水平的计算
根据敏感品系的LC值和测试种群的LC值，按式（3）计算测试种群的抗性倍数.
TS
RR= (3)
式中：
RR T 一测试种群的抗性倍数； 测试种群的LC；S 敏感品系的LC
按照抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药性水平做出评估.
