QB
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T4854-2015
橙汁中总糖和果肉的稳定碳同位素比值 （C/C）测定方法 稳定同位素比值质谱法
Determinationof the carbon isotope ratio(1c/C）of total sugarand pulpin orange juice-Method using isotope ratio mass spectrometry
中华人民共和国工业和信息化部 发布
前言
本标准由中国轻工业联合会提出. 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由全国食品发酵标准化中心归口.本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、农夫山泉股份有限公司、康师傅中央研究所.本标准主要起草人：钟其顶、徐胜、章答鹏、王道兵. 本标准为首次制定.
橙汁中总糖和果肉的稳定碳同位素比值（C/C）测定方法 稳定同位素比值质谱法
1范围
本标准规定了应用稳定同位素比值质谱法测定橙汁中总糖和果肉的稳定碳同位素比值（"c/℃）的方法.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件、凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法
GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法
3符号和缩略语
下列符号和缩略语适用于本文件.
"c/"C：稳定碳同位素比值，是稳定碳同位素c与"C的原子丰度之比.C：样品的稳定碳同位素比值相对于参考物质的稳定碳同位素比值的干分差. PDB：关国南卡罗来纳州白毫纪皮狄组层位中的拟箭石化石（Pee-DccBelemnite），是稳定碳同位素比值的国际基准物质.
IRMS：稳定同位素比值质谱仪（IsotopeRatio Mass Spectrometry）.
4原理
中的稳定碳同位素比值，再通过公式计算得出总糖或果肉的o℃.
5试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682-2008规定的一级水.
5.1氢氧化钙.
5.20.1mol/L硫酸溶液：量取5.56mL浓硫酸（密度1.84g/cm²），缓缓注入约700mL水中，冷却后
稀释至1000mL.
5.3氧气（O）：纯度不应小于99.99%.
5.4氮气（He）：纯度不应小于99.999%
5.6参考物质：可选择国际原子能机构或全国标准物质管理委员会认可的，或其他获得认可的同类参 考物质，参见附录A
6仪器
6.1元素分析仪.
6.2IRMS：分析内精度优于0.05%，配套连续流进样接口.
QB/T 4854-2015
6.6pH计.
6.7分析天平：感量0.01g.
6.8电子天平：感量0.01mg
7分析步骤
量取30mL样品专离心管（6.3）中，室温条件以3500rmin离心10min， 上清液和沉淀物分别保存，待用.
7.2纯化总糖
将7.1中得到的上清液转移至烧杯中， 入1.4g氢氧化钙，用磁力我拌器 6.4）搅拌均匀后，置于90C水浴（6.5）中加热3min：将烧杯中的 合物转移至离心管（6.3） 室温下以3500rmin离心3min质弃去沉淡，用0.1motL硫酸溶液（3.2）调整上清液至pH为5.0左右：将酸化后的上清液于4C下静置15h~24h，保存上清液，待用.
7.3纯化果肉
7.3.1除去果肉中的残糖
量取30mL水复溶7.1中的沉淀物，用磁力搅拌器搅拌均匀后以3500r/min离心10mm，弃去上清液并保留沉淀物.该过程共进行3次
7.3.2除去果肉中的脂质
量取30mL丙酮复溶7.3.1中的沉淀物.用磁力搅拌器搅拌均匀后以3500r/mm离心10min，弃去上清液并保留沉淀物 该过程共进行3次.将沉淀物中残留的树制挥发干净后保存，待用.
7.4冷冻干燥
将总糖上济液（7.2）和果肉沉淀物（7.3.2）置于冷冻干燥机（6.9）中进行冷冻干线处理，分别保存总糖和果肉的粉末，
7.5测定
7.5.1样品及参考物质准备
分别程取0.1mg~0.2mg（或根据元素分析仪的性能进行选择）总糖粉末（74）、果肉粉末（7.4）和参考物质（5.6）于相互独立的锡舟中，密封待用.
7.5.2分析序列
采用两 标准漂移校正模 排分析序列，每个分析序列应同时测定橙汁样品的总糖和果肉粉末（7.4）以及参考物质， 参考物质的比例一 般为样品个数的10%~20%
7.5.3样品测定 调整元素分析仪和IRMS至王作状态，根据已设定的分析序列（7.2）进行测定
8计算
8.1分析结果的表述
总糖或果肉样品的稳定碳同位素组成以其对参考物质中相应同位素比值的千分差（记为%）表示，按公式（1）计算：
8.2结果计算
9精密度
9.1重复性
在重复性条件下，两次独立测试所得结果的绝对差值不应超过重复性限（r）：提计中总糖r-0.26%，橙汁中果肉r0.32%.如果差值超过重复性限（r），应含弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定.
9.2再现性
在再现性条件 两次独立测试所得结果的绝对差值不应超过再现性限（R）：概汁中总糖R-0.66%橙汁中果肉R- 08%0
