中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4587-2016
出口食品中顺丁烯二酸和 顺丁烯二酸酐总量的测定方法
Determinationmethods of total contentofcis-2-butenedioicacid and cis-2-butenedioic anhydride in foods for export
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.
本标准起草单位：中华人民共和国广西出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出人境检验检疫局、湖南检验检疫科学研究院.
本标准主要起草人：吴玉杰、孙利、吕春秋、蒋萍萍、曾琪、罗兆飞、李、蔡翔字、赵广莹、张超、黄志强、刘军义、刘正才、徐敦明.
出口食品中顺丁烯二酸和 顺丁烯二酸酐总量的测定方法
1范围
本标准规定了食品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐总量的测定方法.本标准第一法适用于淀粉及淀粉制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐总量的测定.本标准第二法适用于淀粉、粉丝、粉圆中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐总量的测定.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3制样
3.1试样的制备
匀，备用. 淀粉样品：按四分法取样，备用.干淀粉制品样品：粉碎制成粉末，备用：湿淀粉制品样品：粉碎揽
3.2试样保存
淀粉及干淀粉制品样品常温下储存，湿淀粉制品样品冷藏储存.在保存过程中，应防止样品受到污染或发生待测物残留含量的变化.
第一法气相色谱-质谱联用法
4方法提要
试样经甲醇提取，提取液经甲酯化，气相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量.
5试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水.
5.1乙酸乙酯（CHCOOCHCH）：色谱纯. 5.2甲醇（CHOH）：色谱纯.5.3浓硫酸：纯度≥98%.5.4饱和氯化钠溶液.5.5标准品：顺丁烯二酸酐（CAS号：108-31-6），纯度≥98%：顺丁烯二酸（CAS号：110-16-7），纯度
≥99%.
5.6标准贮备液：精确称取顺丁烯二酸（或酐）标准品10.0mg，用甲醇溶解并定容至10mL，顺丁烯二酸（或酐）浓度为1.0mg/mL.作为标准贮备液.
5.7标准工作液：取适量标准贮备液用甲醇稀释成浓度分别为1.0mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L.10mg/L、50mg/L、100mg/L作为标准工作液.
6仪器和设备
6.1气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击离子源（EI）.
6.3低速离心机：5000r/min.6.4涡旋混匀器.6.6控温水浴锅. 6.7氮气浓缩仪，6.8锥形瓶：100mL，具塞.6.9聚丙烯离心管：50mL，15ml.
6.2分析天平：感量1mg.
6.5粉碎机.
7测定步骤
7.1样品前处理
7.1.1提取
称取2.0g（精确至0.01g）粉碎的样品于50mL塑料离心管中，加人5mL甲醇（5.2），涡旋混匀2min，4000r/min离心10min，提取上清液，每次5ml.甲醇重复提取两次，合并3次提取液至100ml具塞锥形瓶.
7.1.2甲酷化
甲醇提取液中加人浓硫酸（5.3）1.5mL.80C水溶回流1h，冷却至室温后，加人20mL饱和氯化钠溶液，再依次用10mL、5mL、5mL乙酸乙酯（5.1）萃取有机相，收集上层有机相至50mL离心管中，涡旋混匀后，取5mL提取液至15mL离心管中.45C氢气吹至近干，用乙酸乙酯定容至5mL.4000r/min离心5min，取1mL装瓶，待气相色谱-质谱测定.
7.2标准曲线的绘制
分别量取浓度为 1.0 mg/L、2.5 mg/L、5.0mg/L、10 mg/L、50 mg/L、100mg/L的标准工作液15 mL 按7.1.2步骤操作，仪器响应的峰面积对浓度（或质量）作线性回归曲线，作为标准曲线，用于定量.
7.3气质联用测定
7.3.1参考条件
7.3.1.1色谱柱：DB-5MS石英毛细管柱，30m×0.25mm（内径），膜厚0.25μm，或相当者.7.3.1.2柱温：60C（5min）5C/min165C（1min）30C/min250C（3min）.7.3.1.3载气：氮气，纯度≥99.999%，流速：1.3ml/min.
7.3.1.4进样口温度：240℃.
7.3.1.5离子源温度230℃.7.3.1.6GC-MS接口温度：280C.7.3.1.7进样方式：分流进样，分流比11.7.3.1.8进样量：1pl7.3.1.9电离方式：EI. 电离能量：70eV.7.3.1.10 7.3.1.11 溶剂延迟：3min.7.3.1.12测定方式：选择离子监测方式（SIM），监测离子（m/z）：113（定量离子）、59、85.
7.3.2定性测定
对标准工作液及样液按7.3.1规定的条件进行测定，顺丁烯二酸（酐）衍生产物的保留时间约为9.72min，如样品中待测物质和顺丁烯 二酸二甲酯的保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中均出现；同时将样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准工作液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，若偏差在表1规定允许的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物.顺丁烯二酸（酐）衍生物的定性离子（m/z）相对丰度比为1135985=100：18.6：12.3，总离子流色谱图参见图A.1，质谱图参见图A.2.
表1使用定性气相色谱-质谱时相对离子丰度最大允许偏差
相对丰度 >50% >20%~50% >10%- % ≤10X允许的相对偏差 ±10% E137 ±50%
7.3.3定量测定
根据样液中被测物含量情况，绘制合适的标准工作曲线.标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，根据定量离子113对其进行标准曲线定量.
7.4空白试验
除不加试样外，均按上述步骤进行.
7.5结果计算
样品中顺丁烯二酸（酐）含量按式（1）计算：
式中：
c 样液中顺丁烯二酸（酐）的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；co 乙酸乙酯提取液体积，单位为毫升（mL）； 空白样液中顺丁烯二酸（酐）的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；v m 称样量，单位为克（g）.
标准工作曲线中得到的试样中顺丁烯二酸（酐）的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
计算结果保留至小数点后两位.
