标
犬科实验动物感染细粒棘球绦虫技术规范
Technicalspecification for experimental canine animals infectedwithEchinococcusgranu/osus
报批稿
中国兽医协会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中国兽医协会提出并归口.
本文件起草单位：新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站、新疆兴牧源农业有限责任公司、吉木萨尔县动物疫病预防控制中心、木垒县动物疾病预防控制中心、奇台动物疾病预防控制中心、伊犁州动物疫病预防控制中心、昌吉州动物 疾病预防控制中心、巴州动物疾病控制与诊断中心、新疆农业大学.
本文件主要起草人：班万里、赵莉、吾力江卡马力、刘帅、潘星羽、王冰洁、张壮志、张旭、艾尔肯艾沙、王思云、艾分沙比汗、雏维东、穆尼拉特列吾汗、权晨曦、张玲、王延、古丽扎提塔力甫汗、喻昌盛、慕永辉.
引言
包虫病（棘球病）是一种严重的人兽共患慢性寄生虫疾病，呈世界性分布，WOAH将该病列为B类病，我国农业农村部《一、二、三类动物疫病病种名录》将其列为二类动物疫病.囊型包虫病是由细粒棘球绦虫的幼虫（细粒棘球）寄生于中间宿主组织器官所致，多见于农牧区，我国主要分布在新疆、甘肃、宁夏、青海、四川、内蒙和西藏等西部7省区，覆盖国土面积约44%.囊型包虫病严重危害疫区人民健康、农副产品绿色生产、畜牧业发展、食品和环境安全，极大的制约着乡村振兴战略的实施.
制定切实可行的囊型包虫病高效综合防制措施迫在眉睫，防控措施的制订需要以检测诊断、疫苗研制、药物研发、致病机理等方面研究为支撑.动物模型的建立对动物疫病发展趋势、临床表现、检测诊断、疫苗研制、药物研发、治病机理研究和防控等起重要作用，特别是寄生虫病原学以虫体形态作为最主要的鉴别依据，因此急需建立囊型包虫病病原，即细粒棘球缘虫感染动物模型.
本文件中动物模型建立方法适用于类似囊型包虫病的犬科动物寄生虫病感染模型建立、对疫苗免疫效果保护判定、新药物研发药效判定及检测诊断方法的敏感性、特异性研究：获得的相关样品适用于囊型包虫病的病原学基础研究、检测诊断、致病机理研究和防控等.
犬科实验动物感染细粒棘球绦虫技术规范
1范围
本文件规定了犬科动物感染细粒棘球缘虫模型建立的技术要求.
本文件适用于从事人兽共患囊型包虫病防控研究、检测诊断、疫苗研制、药物研发、致病机理研究等活动的单位和个人.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB19489实验室生物安全通用要求GB/T14922.1实验动物寄生虫等级与监测GB/T14922.2实验动物微生物等级与监测GB/T32948犬科动物感染细粒棘球缘虫粪抗原抗体夹心酶联免疫吸附试验诊断技术 GB/T14925实验动物环境及设施GB/T36195畜禽粪便无害化处理技术规范GB/T39646实验动物健康监测总则
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4缩略语
下列缩略语适用于本文件.DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）Eg：细粒韩球绦虫（Echinococcus granulosus） EgPSC：细粒棘球绦虫原头（Echinococcus granulosus protoscolices）HE 染色法：苏木精-伊红染色法（hematoxylin-cosin staining）PCR：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）PSC：原头（Protoscolices）
5感染、剖检场所与人员要求
5.1感染、剖检场所
T/CVMA 336-2026
感染与韵检场所应远离人员聚集区域和动物饲养密集地区.应划分为准备区和污染区，两区之间应设物理屏障.准备区为防护用品及工作人员穿戴防护用品的区域：污染区为感染区和部检操作区域，严禁非工作人员进入.
5.2剖检器材、试剂和耗材
5.2.1配备手术台、绳子、解剖刀、剪刀、止血钳、镊子等副检材料.
5.2.2配备普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、离心机、15mL离心管、50mL离心管、2mL离心 管、温度计、1000mL锥形瓶、500mL烧杯、2mL冻存管、5mL注射器、无菌培养Ⅲ、巴斯德吸
管、水桶、封口袋、摄影器材.
5.2.3配备0.9%氯化钠溶液、4%多聚甲醛、RNAlater、0.9%氯化钠溶液（37~40°C）、麻醉剂.
5.2.4实验（采样）场所应设置更衣室，人员进入实验室前应跟换防护服，穿着防护设备.
5.3实验人员要求
5.3.1开展实验前需通过动物伦理委员会审定，实验操作要符合实验动物伦理标准.
5.3.2应对参与实验人员进行生物安全、实验室规则的培训，掌握相关仪器、设备、防护用品使用的操作步骤和要点，使其能进行正确操作并使用：对实验室人员进行人工感染实验犬的操作及知识 培训，主要包括：临床样本采集、处理方法：动物的饲养、观察、称重、测温、记录及动物福利等：动物麻醉、感染、采样等技术操作方法：动物解剖、病理取材方法.
6实验犬质量控制要求
6.1实验犬要求
6.1.1细粒棘球缘虫人工感染犬选用10~18月龄健康的比格实验犬.
6.1.2实验犬体重约9kg~12kg，需满足实验条件.
6.2感染、剖检场所实验犬背景资料的确认
应选用背景清楚的比格实验犬进行人工感染实验.实验犬的背景信息应包括：年龄、性别、微生物监测情况、寄生虫监测情况、动物繁育及运转记录等.寄生虫监测和微生物监测分别按GB/T14922.1、GB/T14922.2的相关内容进行.
6.3动物饲养
6.3.1动物饲养环境按GB/T14925相关要求进行.
6.3.2实验犬应单笼饲养：
6.3.3实验犬应建立档案，编号并记录耳号.
6.3.4按时为实验犬提供狗粮和饮水，并及时清洁.
6.3.5实验犬的食盆和水盆单独使用，避免混用.
6.4实验犬常规检查
