中华人民共和国国家标准
GB/T6437-2018代替GB/T6437-2002
Determination of phosphorus in feedsSpectrophotometry
中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准代替GB/T6437-2002《饲料中总磷的测定分光光度法》.本标准与GB/T6437-2002相比，主要技术内容修改如下：增加了检出限和定量限（见第1章）；修订了磷测定方法原理的表述（见第3章，2002年版的第3章）：增加了磷标准贮备液保存期（见4.4）；一删除干灰化法中"不适用于含磷酸二氢钙[Ca（HPO）：]的饲料"的内容（见7.1.1，2002年版 一修改了采样和试样制备方法（见第6章，2002年版的第6章）；的 7.1.1);修订了标准曲线的范围，由原来的“0μg/mL~16μg/mL"改为“0μg/mL~15μg/mL”（见7.2 2002年版的7.2）.本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口. 本标准起草单位：上海市兽药饲料检测所.本标准主要起草人：商军、华贤辉、黄士新、陆淳、曹莹、田恺、张浩然、孙冰清.本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 6437-1992 GB/T .
饲料中总磷的测定分光光度法
1范围
本标准规定了饲料中总磷含量测定的分光光度法.本标准适用于饲料原料及饲料产品中磷的测定. 当取样量5g，定容至100mL时，检出限为20mg/kg，定量限为60mg/kg.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备
3原理
试样中的总磷经消解，在酸性条件下与钒钼酸铵生成黄色的钒钼黄[（NH）PONHVO16MoO.络合物.钒钼黄的吸光度值与总磷的浓度成正比.在波长400nm下测定试样溶液中钒钼黄的吸光度值，与标准系列比较定量.
4试剂或材料
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水.试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备.试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液.
4.3盐酸溶液：盐酸水=11（VV）
4.4磷标准备液（50pμg/mL)
取105C干燥至恒重的磷酸二氢钾，置干燥器中，冷却后，精密称取0.2195g，溶解于水，定量移人1000mL容量瓶中，加硝酸3mL.加水稀释至刻度，摇匀，即得.置聚乙烯瓶中4C下可储存1个月.
4.5钒钼酸铵显色剂
称取偏钒酸铵1.25g，加水200mL加热溶解，冷却后再加人250mL硝酸（4.1），另称取钼酸铵25g，加水400mL加热溶解，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用水稀释至1000mL，避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用.
5仅器设备
5.1分析天平：感量0.0001g.5.3高温炉：可控温度在土20C. 5.2紫外-可见分光光度计：带1cm比色Ⅲ.5.4电热干燥箱：可控温度在土2℃C.5.5可调温电炉：1000W.
6试样的制备
按GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取约200g，按照GB/T20195制备样品，粉碎后过0.42mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中，备用.
7试验步骤
7.1试样的前处理
7.1.1干灰化法
称取试样2g~5g-精确到1mg置于坩埚中，在电炉上小心炭化，再放入高温炉，在550℃灼烧3h（或测粗灰分继续进行），取出冷却，加盐酸溶液（4.3）10mL和硝酸（4.1）数滴，小心煮沸约10min，冷却后转人100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为试样溶液.
7.1.2湿法消解法
称取试样0.5g~5g-精确到1mg，置于凯氏烧瓶中，加人硝酸（4.1)30mL，小心加热煮沸至黄烟逸尽，稍冷，加人高氯酸（4.2）10mL，继续加热至高氯酸冒白烟（不得蒸干），溶液基本无色，冷却，加水30mL，加热煮沸，冷却后用水转入100mL容量瓶中并稀释至刻度，摇匀，为试样溶液.
7.1.3盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）
称取试样0.2g~1g，精确到1mg，置于100mL烧杯中，缓缓加人盐酸溶液（4.3）10mL，使其全部溶解，冷却后转入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，为试样溶液，
7.2磷标准工作液的制备
准确移取磷标准贮备液（4.4）0mL、1mL、2mL、5mL、10mL.15mL于50mL容量瓶中（即相当于含磷量为0μg、50μg、100μg、250μg、500μg、750μg），于各容量瓶中分别加人钒钼酸铵显色剂（4.5）10mL，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，以0mL磷标准溶液为参比.用1cm比色m，在400nm波长下用分光光度计测各溶液的吸光度.以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线.
7.3试样的测定
准确移取试样溶液1mL~10mL（含磷量50μg~750μg）于50mL容量瓶中，加人钒钼酸铵显色光光度计测定试样溶液的吸光度，通过工作曲线上计算试样溶液的磷含量.若试样溶液磷含量超过磷 剂（4.5）10mL，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，用1cm比色Ⅲ，在400nm波长下用分2
标准工作曲线范围，应对试样溶液进行稀释.
8试验数据处理
8.1结果计算
试样中磷的含量，以质量分数计，数值以%表示，结果按式（1）计算：
式中：
to 一试样中磷的含量；V 一通过工作曲线计算出试样溶液中磷的含量，单位为微克（μg）； 一试样溶液的总体积，单位为毫升（mL）；m 一试样质量，单位为克（g）；V 试样测定时移取试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；10′ -换算系数.
8.2结果表示
每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，所得到的结果应表示至小数点后两位.
9精密度
在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一饲料样品相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值，当试样中总磷含量小于或等于0.5%时，不得大 于这两次测定值的算术平均值的10%；当试样中总磷含量大于0.5%时，不得大于这两次测定值的算术平均值的3%，以大于这两次测定值的算术平均值的百分数的情况不超过5%为前提.
