中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 5872-2025
出口食品中诺如病毒和甲肝病毒检测方法 实时荧光逆转录重组酶介导链替换核酸 扩增法(实时荧光RT-RAA法)
Qualitative detection of Norovirus and hepatitis Avirus in food for exportReal-time reverse transcription rebinase-aid amplification method(Real-timeRT-RAA)
中华人民共和国海关总署发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口.
本文件起草单位:拱北海关技术中心、广东产品质量监督检验研究院、中国海关科学技术研究中心.珠海粤港食品安全检测有限公司.
本文件主要起草人:姚丽锋、张娟、张晴阳、王小玉、魏海燕、麻丽丹、冯家望,黎财慧、游淑珠、唐食明、曾俊洁、李清岚.
出口食品中诺如病毒和申肝病毒检测方法 实时荧光逆转录重组酶介导链替换核酸 扩增法(实时荧光RT-RAA法)
1范围
本文件描述了出口食品中诺如病毒GI、GI型和甲肝病毒的实时荧光RT-RAA检测方法.本文件适用于贝类、生食蔬菜、软果、硬质表面食品中诺如病毒GIGⅡI型和甲肝病毒的定性检测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本文件.
GB4789.42食品安全国家标准食品微生物学检验诺如病毒检验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
实时荧光RAAreal-time RAA
重组酶介导链替换的恒温核酸快速扩增技术.利用从细菌或真菌中获得的重组酶.在恒温下(一般为37℃~42℃)该重组酶可与引物紧密结合,形成酶和引物的聚合体.在单链DNA结合蛋白的帮助下,打开模板DNA的双链结构,当引物在模板上搜索到与之完全匹配的互补序列时.在DNA聚合酶的 作用下,形成新的DNA互补链,扩增产物以指数级增长.利用荧光探针的标记,随着RAA反应进行,RAA产物与荧光信号的增长呈现对应关系.
注:简称RAA技术.
3.2
实时荧光RT-RAAreal-time reverse transcription RAA
在RAA技术基础上,体系中加人逆转录酶,在同一管中完成逆转录和RAA试验,实现对RNA模板进行实时荧光逆转录检测的技术.
3.3
Ct 值cyele threshold
每个反应管内的荧光信号达到设定阀值时所经历的循环数.
3.4
T值time threshold
每个反应管内的荧光信号达到设定网值时所需要的时间.