中华人民共和国国家标准
GB/T15670.18-2017部分代替GB/T15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第18部分：啮齿类动物显性致死试验
Toxicological test methods for pesticides registrationPart 18:Rodentdominantlethaltest
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分：
第1部分：总则；-第2部分：急性经口毒性试验霍恩氏法；第3部分：急性经口毒性试验序贯法； 第4部分：急性经口毒性试验概率单位法；第5部分：急性经皮毒性试验；-第6部分：急性吸人毒性试验；第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验：第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； 第9部分：皮肤变态反应（致敏）试验：第10部分：短期重复经口染毒（28天）毒性试验：第11部分：短期重复经皮染毒（28天）毒性试验；第12部分：短期重复吸人染毒（28天）毒性试验；第13部分：亚慢性毒性试验： 第14部分：细菌回复突变试验：一第15部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验；-一第16部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验；第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验； 第18部分：嘀齿类动物显性致死试验：第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验；第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验：第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS）试验：第23部分：致畸试验； 第22部分：体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验：第24部分：两代繁殖毒性试验；第25部分：急性迟发性神经毒性试验；第27部分：致癌试验； 第26部分：慢性毒性试验；第28部分：慢性毒性与致癌合并试验；第29部分：代谢和毒物动力学试验.本部分为GB/T15670的第18部分.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本部分部分代替GB/T15670-1995《农药登记毒理学试验方法》. 本部分与GB/T15670-1995的显性致死突变试验部分相比主要变化如下：修改和调整了标准的总体结构和编排格式；增加了一些章节内容（见第1章、第2章、第3章、第4章、第5章、6.1和第8章）；一修改了剂量和分组的内容（见6.3，1995年版的14.7.2）； 修改了对实验动物的要求（见6.2.1995年版的14.7.1）；
GB/T 15670.18-2017
一修改了染毒方式内容（见6.4，1995年版的14.7.3）；一修改了数据处理内容（见第7章，1995年版的14.7.6）.本部分由中华人民共和国农业部提出.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司归口.本部分起草单位：农业部农药检定所. 本部分主要起草人：肖杭、环飞、张丽英、陶传江.本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T 15670-1995
农药登记毒理学试验方法 第18部分：啮齿类动物显性致死试验
1范围
GB/T15670的本部分规定了嗮齿类动物显性致死试验的基本原则、方法和要求. 本部分适用于为农药登记而进行的晴齿类动物显性致死试验.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB14925实验动物环境及设施
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
显性致死突变dominant lethalmutation
发生于生精细胞的突变，不引起配体的功能异常，但能引起受精卵或发育中的胚胎死亡.
4试验目的
本试验是一项生殖细胞致突变试验，用来检测受试物对整体哺乳动物生殖细胞的遗传损伤，进一步确证体外试验或其他试验系统获得的阳性结果，以评价受试物能否引起显性致死突变.
5试验概述
引起显性致死的染色体损伤主要为染色体断裂.显性致死的主要表现是受精卵着床前丢失或着床后胚 哺乳动物发育中的精子在物理或化学因素作用下，发生染色体损伤，从而使受精卵在发育中死亡.胎早期死亡，
通过适当的途径使雄性动物接触受试物，然后与未经染毒且未交配过的雌性动物交配，交配结束后，取出雌性动物.雌性动物于妊娠后半期处死，剖开腹腔，取出子宫，检查两侧子宫内的胚胎植人数（着床数）、早死胎、晚死胎和活胎数，雄性动物每间隔一定时间再与另一批未经染毒且未交配过的雌性 动物交配，如此共进行数批，以保证覆盖一个精子周期.
6试验方法
6.1受试物配制
受试物首选蒸馏水作溶剂，如受试物不溶于水，可用食用油（如玉米油、橄榄油等）、食用淀粉、0.5%
GB/T 15670.18-2017
羧甲基纤维素钠配成乳浊液或悬浊液.受试物应于灌胃前新鲜配制，除非有资料表明以溶液（或乳浊液、悬浊液）保存具有稳定性.如不是常用溶剂，应有参考资料并说明其成分及选做溶剂的原因.
6.2实验动物
6.2.1动物的选择
应选用低背景的显性致死率、高妊娠率、高植人数、健康、性成熟的动物品系，推荐用大鼠或小鼠，动物品系一般选用两个近交系的杂交一代或远交系动物，动物均应性成熟.大鼠雄性为50只，雌性 至少需800只；小鼠雄性为75只，雌性至少需900只：按体重随机分成染毒组和对照组，共五组，雄性动物给予受试物后每只动物分笼饲养.为避免同一群体动物中保留的劣性致死遗传因子的影响，雌雄鼠不能来自同一杂交群.
6.2.2饲养环境
6.2.2.1检疫、适应时间：检疫、适应3d~5d6.2.2.2饲养环境：应符合GB14925的有关规定.
6.3剂量与分组
6.3.1染毒组
LD，高剂量的设计约为1/3LD~1/10LD，高剂量应能使实验动物出现毒性反应或繁殖能力轻微 一般设三个染毒剂量组.剂量水平的确定应参照先前的毒性试验和预试验结果，如已知受试物的降低.然后以高剂量组的1/3和1/10作为中剂量和低剂量.若受试物LD不能测出时，可用5000mg/kg体重或5mL/kg体重的剂量作为最大剂量.染毒途径一般采用经口染毒.
6.3.2对照组设定
6.3.2.1每次试验每一样品都应设置相应的阳性对照和阴性（溶剂）对照，除不给予受试物染毒之外，对照组动物应与染毒组动物以相同方式进行操作.
6.3.2.2阳性对照的染毒途径可不同于受试物染毒途径，以出现预期的阳性结果，证实试验系统敏感性.常用阳性对照物参见附录A.
6.3.2.3阴性对照为溶剂对照.如果没有历史对照资料证明所用溶剂、载体无细胞毒性或无致突变作 用，则应增设空白对照.
6.4染毒方式
第5天时染毒一次.其他的染毒方式应说明理由. 将雄性动物以设计好的剂量和途径染毒，连续染毒5d，阴性对照组给予相应溶剂.阳性对照组在
6.5试验步骤
6.5.1交配
在最后一次染毒后的当天，将每只雄鼠单放在一只笼内，与2只～3只未交配过的雌鼠同笼5d，5d后移走雌鼠（一般同笼5d，交配率可达90%）.雌鼠放人另外笼中分组群养，直到处死.雄鼠休息2d后再放人第二批未交配的雌鼠继续交配.小鼠连续6周～8周，大鼠连续8周～12周.为防止鼠龄、体 重对结果的干扰，用于每批交配的雌鼠周龄、体重要近似.
