中华人民共和国国家标准
GB/T 17999.4-2008代替GB/T 17999.31999
SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 4: Serum plate agglutination test for SPF chicken
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T17999《SPF鸡微生物学监测》分为10个部分：一第I部分：SPF鸡微生物学监测总则； 第2部分：SPF鸡红细胞凝集抑制试验：一第3部分：SPF鸡血清中和试验；-第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验；第6部分：SPF鸡酵联免疫吸附试验： 第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验；一第7部分：SPF鸡胚敏感试验：第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验；-第9部分：SPF鸡试管凝集试验：一第10部分：SPF鸡间接免疫荧光试验.
本部分为GB/T17999的第4部分.
本部分修订参照了NY/T553-2002（禽支原体病诊断技术》和NY/T536-2002鸡伤寒和鸡白诊断技术》中的有关规定，
本部分代替GB/T17999.3-1999《SPF鸡血清平板凝集试验》
本部分与GB/T17999.3-1999相比主要变化如下：
增加了生理盐水作为阴性对照.
本部分由中华人民共和国农业部提出.
本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口.
斯家禽有限公司. 本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法
本部分主要起草人：曲连东、姜赛、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、孟庆文.
本部分所代替标准的历次版本发布情况为：
-GB/T 17999. 3-1999
第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验 SPF鸡微生物学监测
1范围
GB/T17999的本部分规定了鸡血清平板凝集试验的技术要求.
本部分适用于对SPF鸡进行以下病原微生物的血清抗体检测：鸡白痫沙门氏菌（Sabmonellapullorum）、鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum）、潜液囊支原体（Mycoplasma synoviae）、副鸡嗜血杆菌（Haemophilusparagauinarum）.
2原理
血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后在适量的电解质参与下，经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象，常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体.
3试剂和材料
3.1试剂
3.2材料
玻璃板，移液器（TD10L~200pL）及吸头.
4操作程序
4.1使用前10min~20min自冰箱取出抗原、阴性标准血清、阳性标准血清及被检血清，使其达到室温.4.2用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴（0.025mL~0.05ml），垂直滴于玻璃板上，然后迅速在抗原旁边滴加同量的被检血清一滴（0.025mL~0.05mL）. 4.3用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1cm~2cm的片状，不断摇动玻璃板，2min内观察结果.4.4试验应在20C~25C条件下进行.4.5每批试验应设阳性血清、阴性血清及生理盐水对照.
5结果判定
在2min内出现50%（十）以上凝集者为阳性.2min内不凝集（一）者为阴性，介于上述两者之间为可疑，进行复核试验，如仍为可疑，判为阳性.凝集判读标准见表1.
