中华人民共和国国家标准
GB/T 17999.8-2008代替GB/T 17999.7-1999
SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 8:Examination of Salmonella pullorum for SPF chicken
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
GB/T17999SPF鸡微生物学监测》分为10个部分：
第1部分：SPF鸡微生物学监测总则； 一第2部分：SPF鸡红细胞凝集抑制试验：第3部分：SPF鸡血清中和试验；-第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验；一第6部分：SPF鸡酵联免疫吸附试验： 第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验；第7部分：SPF鸡胚敏感试验：一第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验；第9部分：SPF鸡试管凝集试验；一第10部分：SPF鸡间接免疫荧光试验.
本部分为GB/T17999的第8部分.
本部分修订参照了NY/T556-2002（鸡传染性联气管炎诊断技术》和（IE（陆生动物（哺乳动物、禽鸟和蜜蜂）诊断试验和疫苗手册》（第五版）中的有关规定.
本部分代替GB/T17999.7-1999（SPF鸡鸡白痛沙门氏菌检验》.
本部分与GB/T17999.7-1999相比主要变化如下：
-增加了活禽泄殖腔拭子检测样品：增加了沙门氏菌菌体抗原血清学检测方法：增加了附录A"革兰氏染色方法及生化试验结果判定”；一对试验操作程序进行了修订，将细菌镜检程序提前； 在范围中进一步明确了本部分使用的情况；剩除了引用标准：
一修订了试验操作程序.
本部分的附录A为规范性附录.
本部分由中华人民共和国农业部提出.
本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口.
本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司
本部分主要起草人：曲连东、姜赛、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、孟庆文.
本部分所代替标准的历次版本发布情况为：
GB/T 17999. 71999
SPF鸡微生物学监测 第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验
1范围
GB/T17999的本部分规定了鸡白沙门氏菌检验的技术要求.本部分适用于对SPF鸡进行鸡白痫沙门氏菌的分离和鉴定.用血清平板凝集试验进行鸡白痢沙门氏菌的抗体检测，结果难以判断时，可采用本部分进行复检.
2原理
取待检样品（肠内容物、有关脏器匀浆、活禽泄殖腔拭子）接种于增菌培养基中进行增菌，然后将培养物转移到选择、鉴别培养基上培养，携选可疑菌落接种于营养琼脂培养基上，取培养物进行生化试验与血清学试验，以确定鸡白痛沙门氏菌.
3试剂和器材
3.1材料
3.1.1培养基
琼脂. 营养肉汤培养基、DHL琼脂、SS琼脂、亚硫酸琼脂（BS）、三糖铁培养基（TSI）、营养琼脂、半固体
3.1.2生化反应试剂
糖发酵培养基、蛋白陈水、硝酸盐培养基、氧化酶试剂、氨基酸脱羧酶试验培养基、尿素培养基（结果判定见附录A）.
3.1.3沙门氏菌诊断血清
A-F多价O血清、O9因子血清、O12因子血清、H-a因子血清、H-d因子血清、H-g.m因子血清和H-g.p因子血清.
3.2器材
37C恒温培养箱.
4操作步骤
4.1采样
无菌采取卵巢、肝、脾以及小肠和盲肠，活禽泄殖腔拭子.
4.2分离培养
腔拭子分别在SS或BS和DHL琼脂平板培养基上划线接种置（36土1)C培养24h~48h.在DHL 将采集样品放入灭菌乳体或均浆器中研磨成匀浆，加人少量营养肉汤稀释.取培养物或活禽泄殖培养基上若出现黄褐色透明小菌落；或在SS琼脂平板上出现无色半透明圆形小菌落：或在BS琼脂平板上出现黑色或黑绿色小菌落，则为可疑菌落.如果经24h～48h培养后未发现可疑菌落，再取增菌培养物重复划线分离培养1次.
4.3病原鉴定
4.3.1镜检
取可疑菌落，涂片作革兰氏染色，具体操作见附录A.镜检可见革兰氏阴性杆菌，大小为
