中华人民共和国国家标准
GB/T32268-2015
十八烷基键合相（C18）高效液相色谱柱 性能测定方法
Method of performance testing for octadecyl bonded(C18)high performanceliquid chromatography(HPLC) column
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出.
本标准由全国仪器分析测试标准化技术委员会（SAC/TC481）归口.
本标准负责起草单位：天津博纳艾杰尔科技有限公司.
本标准参加起草单位：中国分析测试协会、北京大学、中国科学院化学研究所、中国计量科学研究院、中国食品药品检定研究院、北京有色金属研究总院、沃特世科技（上海）有限公司、大连依利特分析仪器有限公司、北京金欧亚科技发展有限公司.
本标准主要起草人：王宛、汪群杰、赵羽、张学云、张庆合、刘国铨、刘虎威、胡昌勤、汪正范、蔡会霞、汪若梅.
十八烷基键合相（C18）高效液相色谱柱 性能测定方法
1范围
本标准规定了十八烷基键合相高效液相色谱柱（简称"C18HPLC柱”）性能的测定方法.本标准适用于C18HPLC柱性能的测定.
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T9008液相色谱法术语柱色谱法和平面色诺法 GB/T32267分析仪器性能测定术语JJG705液相色谱仪检定规程
3术语和定义
GB/T9008和GB/T32267界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
八烷基键合相（C18）高效液相色谱柱octadeeyl bonded high performance liquid chromatographycolumn
装有键合十八烷基的固定相的高效液相色谱柱.
3.2柱内径column internal diameter色谱柱柱管的内径.
3.3 疏水保留因子retention factor of hydrophobicity表征C18固定相的C18烷基链的相对数量的参数，与填料颗粒的比表面积和表面碳覆盖率有关.
表征C18固定相对被分离物质分子疏水基团的选择识别能力的参数，与填料颗粒的表面碳覆盖率有关，
3.5
立体选择性因子steric selectivity factor
a表征C18固定相对被分离物质分子形状的选择识别能力的参数，与填料颗粒表面的官能团键合度
GB/T 32268-2015
和碳覆盖率有关.
3.6
氢键容量因子hydrogen bonding capacity factor
α 表征C18固定相的氢键作用的参数，与纯水中填料颗粒表面残留的游离硅羟基数量有关.
总离子交换容量因子total ion exchange capacity factor
RB
表征C18固定相在pH7.60的流动相中离子交换能力的参数，与填料颗粒表面的硅羟基数量及其他离子交换位点的数量有关.
3.8
酸性环境中离子交换容量因子ion exchange capacity factor in acidic solution
表征C18固定相在pH2.60的流动相中离子交换能力的参数，与在pH2.60时填料颗粒表面的离子交换位点的数量有关.
3.9
金属活性因子metalactivityfactor
αM 表征C18固定相表面杂质金属的含量及配位能力的参数.
3.10
酸性化合物选择性因子selectivity factor for acidic pound
S
表征C18固定相对酸性化合物和中性化合物的分离能力的参数.在实际测定中，其下标中可标示出具体测定物质的名称，如αsx析，
3.11
碱性化合物选择性因子selectivity factor for basic pound
表征C18固定相对碱性化合物和中性化合物的分离能力的参数.在实际测定中，其下标中可标示出具体测定物质的名称，如asx费
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂的级别应不低于分析纯级，水的级别符合GB/T6682一级水的规定.
4.1甲醇（CHOH）：色诺纯.4.2乙晴（CHCN)：色谱纯.4.3磷酸二氢钾（KHPO）.4.5氢氧化钠（NaOH）.4.7 三氟乙酸（CF，COOH）.4.9尿嘧啶（CHNO）. 4.8 三乙胺（CHN）.4.10正丁基苯（CH）2
4.4磷酸（HPO ).
4.6氢氧化钾（KOH）.
4.12邻三联苯（CH）.
4.14咖啡因（CHN O）.
4.15苯酚（CHOH).
4.23磷酸盐缓冲液（pH2.60)
称取1.36g磷酸二氢钾，置于合适的烧杯中，溶解于480.0mL水，用浓磷酸调节pH值至2.60，然后转移并定容于500.0mL的容量瓶中，得到pH2.60的磷酸二氢钾缓冲液.
4.24磷酸盐缓冲液（pH5.80）
称取1.36g磷酸二氢钾，置于合适的烧杯中，溶解于480.0mL水，用氢氧化钾调节液（4.22）调节pH值至5.80，然后转移并定容于500.0mL的容量瓶中，得到pH5.80的磷酸二氢钾缓冲液.
4.25磷酸盐缓冲液（pH7.60）
pH值至7.60，然后转移并定容于500.0mL的容量瓶中，得到pH7.60的磷酸二氢钾缓冲液. 称取1.36g磷酸二氢钾，置于合适的烧杯中，溶解于480.0mL水，用氢氧化钾调节液（4.22）调节
5仪器和设备
5.1高效液相色谱仪
高效液相色谱仪应符合JJG705的规定，并满足以下各项要求：
a）检测器采集频率的设定办法为：1）当测试普通液相色谱柱时，检测器的流通池体积不大于15uL，采集颜率不小于10Hz.注：超高效液相色谱柱指装填有基于亚2pm硅胶基质或亚3pm核壳式硅胶基质的固定相的液相色谐柱.此处所述硅胶基质包括碳杂化硅胶基质.b）柱温箱 高效液相色谱仪需配备柱温箱，其温度设定值最大允许误差为士2C，温度稳定性为不大于1 ℃/h.c）连接管线柱的内径尺寸进行选择：
高效液相色谱仪配备紫外-可见光检测器，其波长范围覆盖190nm～400nm即可，流通池和
色谱柱需要通过材质为PEEK或者不锈钢的连接管线连接到进样器和检测器之间.色谱柱和进样器或者检测器之间的连接管线的长度均不超过25cm，连接管线的内径尺寸根据色谱
1）当色谱柱的柱内径小于2.1mm时，连接管线的内径为0.13mm，
