中华人民共和国国家标准
GB/T 35536-2017
酵母浸出粉检测方法
Examination methodsofyeast extract powder
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口本标准起草单位：北京牛牛基因技术有限公司、中国食品药品检定研究院、安琪酵母股份有限公司. 本标准主要起草人：胡昌勤、牛刚、李啸、苏德模、马仕洪、杨美琴、伍业旭、杨馨、罗必英.
酵母浸出粉检测方法
1范围
本标准规定了酵母浸出粉作为培养基原料的质量检测方法. 本标准适用于药品、食品、化妆品或其他类别微生物检验用培养基中酵母浸出粉的质量检测.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.11-2014食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定 GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB5009.15食品安全国家标准食品中辐的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB5009.124食品安全国家标准食品中氨基酸的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T23530-2009酵母抽提物中华人民共和国药典2015年版四部澄清度检查法（通则0902） 中华人民共和国药典2015年版四部氮测定法（通则0704）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
新鲜酵母经自溶分解，提炼精制而成的黄色或棕黄色可溶性粉末，富含多肽、氨基酸、水溶性维生素及碳水化合物的混合物，可作为培养基中微生物生长的营养源.
3.2
耐热菌数count of heat resistant microorganisms
酵母浸出粉中存在的具有热抗性的微生物数量，主要为耐热芽孢菌.酵母浸出粉耐热菌数为10%CFU/g表示. 酵母浸出粉溶液沸水浴中处理30min后，接种至胰酪大豆陈琼脂（TSA）平板计数得到的菌落数，以
4缩略语
下列缩略语适用于本文件.
GB/T 35536-2017
CFU：菌落形成单位（colony formingunits）TSA：胰酪大豆陈琼脂培养基（soybean-casein digest agar)TSB：胰酪大豆陈液体培养基（soybean-casein digest broth）
5标准菌株
铜绿假单胞菌（Pseudomonax aerginosa）[CMCC（B)10104]滕黄微球菌（Micrococcs ateus）[CMCC（B）28001] 金黄色葡萄球菌（Sraphylococcusaareux）[CMCC（B）26003]枯草芽孢杆菌（BaciZ/ux subilix）[CMCC（B）63501]乙型副伤寒沙门菌（Saimonelfa paratyphi B）[CMCC(B)50094]白色念珠菌（Candidaafbicans）[CMCC（F）98001]
6试剂和溶液
6.1总则
合GB/T6682三级水的规定.未注明何种溶液配制时，均指水溶液.未注明何种条件下灭菌时，均指 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，在未特别注明时，按照GB4789.28规定执行.水应符121℃、15min高压灭菌.
6.20.5%磷酸氢二钾
称取5gKHPO 加水定容至1000mL.
6.31mol/L氢氧化钠
称取40gNaOH加水定容至1000mL.
称取9gNaCl加水定容至1000mL，灭菌后备用.
6.51mol/L氢氧化钾称取56g氢氧化钾加水定容至1000ml.
6.61mol/L盐酸
取浓盐酸约90mL，加水适量使成1000mL，摇匀备用.
6.7TSA
胰陷蛋白陈15g，大豆陈5g，氯化钠5g，琼脂15g，水1000mL.
8S1 89
胰酪蛋白陈17g，大豆肺3g，氯化钠5g，葡萄糖2.5g，磷酸氢二钾（钠）2.5g，水1000mL.
7检测方法
7.1外观
取样品适量，置明亮处，自然光下肉眼观察色泽和性状.
7.2理化指标
7.2.1pH
配制2%水溶液，采用玻璃电极测定灭菌后的pH值.同一样品两次测定值之差应不超过0.04.
7.2.2水分
按照GB5009.3规定执行.
7.2.3灰分
按照GB5009.4规定执行.
7.2.4澄清度
取样品适量，制备2%水溶液，灭菌后放置至室温，按照《中华人民共和国药典》2015年版四部澄清度检查法（通则0902）第一法（目视法）执行.
7.2.5磷酸盐沉淀
高压灭菌30min，置20C士10℃冷却，冷却后平衡30min观察是否有沉淀.
7.2.6碱性沉淀
30min，置20℃土10C冷却，冷却后平衡30min观察是否有沉淀. 取样品适量，配制成2%水溶液，以1mol/1氢氧化钠溶液调节pH8.5±0.5，121C高压灭菌
7.2.7氯化钠
按照GB5009.44-2016中规定的第一法执行.
7.2.8总氮
按照《中华人民共和国药典》2015年版四部氮测定法（通则0704）规定的方法执行.
7.2.9氨基酸态氮
按照GB/T23530-2009中6.5规定的方法执行.
7.2.10总游离氨基酸
按照GB5009.124规定执行，取消水解步骤，样品称取后直接用pH2.2的缓冲液1mL溶解后供测试用.分别测量各单个氨基酸后含量加和为总游离氨基酸.
7.2.11总水解氨基酸
按照GB5009.124规定执行.分别测量各单个氨基酸后含量加和为总水解氨基酸.
7.3卫生指标
7.3.1总砷
按照GB5009.11-2014规定的第一法执行.
