中华人民共和国水产行业标准
SC/T7251-2025
头槽绦虫病诊断方法
DiagnosticmethodsforSchyzocotyle acheilognathi disease
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出.
本文件由全国水产标准化技术委员会水产养殖病害防治分技术委员会（SAC/TC156/SC11）归口.
本文件起草单位：中国科学院水生生物研究所、全国水产技术推广总站、中国水产科学研究院淡水渔业研究中心.
本文件主要起草人：李文祥、王桂堂、张翔、郭传波、邹红、李明、习丙文.
头槽绦虫病诊断方法
1范围
本文件描述了头槽绦虫（Schyzocotyleacheilognarhi）病诊断的试剂和材料、仪器设备、临床症状、样品，以及形态学鉴定、PCR检测和综合判定的方法.
本文件适用于头槽绦虫病的诊断、监测和流行病学调查.
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件.
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1寄生虫parasite[来源：SC/T7011.1-2021 3.2.4.2] 寄生于水生动物的病原，包括原虫、蜡虫和甲壳类等.
3.2寄生虫病parasitosis寄生虫侵人水生动物而引起的疾病.[来源：SC/T7011.1-2021.3.2.4.3]
缘虫病cestodiasis
由缘虫侵人鱼体而引起的寄生虫病.
4缩略语
DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid） 下列缩略语适用于本文件.dNTPs：脱氧核糖核甘三磷酸混合物（deoxy-ribonucleoside triphosphate mixture)EDTA：乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)PCR：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction） rDNA-ITS;核糖体 DNA 的内转录间隔区(ribonsomal DNA-internal transcribed spacer)TAE:Tris-Acetate-EDTA 缓冲溶液Taq ：水生栖热菌（Thermas aquaticus）TE：Tris盐酸和 EDTA 缓冲溶液（EDTA TrisHCI)Tris-HCl：三羟甲基氨基甲烷盐酸[Tris（hydroxymethyl） aminomethane hydrochloride]
5试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅适用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水.5.3加拿大树胶：常温保存.
5.1无水乙醇：常温保存.5.2二甲苯：常温保存.
SC/T 7251-2025
5.4TagDNA聚合酶：-20C保存，避免反复冻融.5. 5dNTPs(2. 5 mmol/L): 含 dATP dTTP dGTP 和 dCTP 各 2. 5 mmol/1.5.6上游引物；5′-GTCGTAACAAGGTTTCCGTA-3′;5.7 DNA marker:200 bp~2 000 bp，-20 C保存. F游引I物;5′-TATGCTTAA(G/A)TTCAGCGGGT-3′5.8核酸染料：-20C保存.5.90.7%生理盐水：按附录A中A.1的要求配制.5.104%甲醛溶液：按A.2的要求配制.5.11高氏洋红液：按A.3的要求配制.5.12裂解缓冲液：按A.4的要求配制.5.1350×TAE电泳缓冲液：按A.5的要求配制.5.141×TAE电泳缓冲液：按A.6的要求配制. 5.15DNA抽提缓冲液1:按A.7的要求配制.5.16DNA抽提缓冲液2：按A.8的要求配制.5.17TE缓冲液：按A.9的要求配制.5.18琼脂糖凝胶（1%）：按A.10的要求配制.5.19阴性对照：不含头槽缘虫的鱼体组织DNA，-20C保存.5.20阳性对照：头槽绦虫DNA，一20C保存.
6仪器设备
6.1体视显微镜.6.2普通光学显微镜.6.3高速冷冻离心机：最高转速10000g以上，温度4℃.6.4普通冰箱：具4C冷藏室和-20C冷冻室.6.6水平电泳系统. 6.5PCR扩增仪.6.7凝胶成像系统.
7临床症状
病鱼体色发黑，身体消瘦，食微下降：典型症状是口常张开，病鱼拒食，腹部前端膨胀，副开腹腔，可见前肠有胃囊状凸起：剖检肠道可见乳白色的扁平带状虫体.
曾8
8.1采样对象采集具有典型临床症状的鱼.8.2采样数量 每一采样批次根据鱼的大小取10尾～20尾.8.3鱼样品保存及运输鱼样品宜活体运输到实验室，冰鲜样品4℃保藏，24h内运输到实验室，立即取样检测.8.4采样部位副开样品鱼的腹腔，剪取整个肠道.8.5虫样品采集与保存 2
