中华人民共和国国家标准
GB/T37492-2019
Inspection of grain and oils-Determination of soluble dietary fibre incereals and cereals products-Enzyme gravimetric method
中国国家标准化管理委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.本标准由国家粮食和物资储备局提出.本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口.本标准起草单位：农业农村部谷物及制品质量监督检验测试中心（哈尔滨）. 本标准主要起草人：单宏、苏萍、杜英秋、马永华、陈国友、程爱华、王乐凯.
粮油检验谷物及其制品 水溶性膳食纤维的测定酶重量法
1范围
本标准规定了酶重量法测定谷物及其制品水溶性膳食纤维的原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤、结果计算和精密度要求.
本标准适用于谷物及其制品中水溶性膳食纤维的测定.
2规范性引用文件
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
GB/T5490粮油检验一般规则
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
谷物及制品试样在缓冲溶液及高温高压作用下水解，通过用热稳定的a-淀粉酶使样品凝胶，过滤，再通过蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶对样品进行消化，去除蛋白质和淀粉，以不能消化的残渣计重，除去灰分为水溶性膳食纤维.
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂应为分析纯，试验用水应符合GB/T6682中二级水的规定.
4.1无水乙酸钠（CHCONa）4.2无水磷酸氢二钠（NaHPO）.4.3磷酸二氢钠（NaHPOHO）.4.4乙酸（CH;COH;）.4.5无水乙醇（CHCHOH）. 4.6丙酮（CHCOCH;）.4.7氢氧化钠（NaOH）.4.8盐酸（HCI).4.9蛋白酶.4.10α-淀粉酶（从猪胰脏提取的V1-B型）. 4.11淀粉葡萄糖苷酶.4.12玻璃棉.4.132.0mol/L缓冲液.4.13.1乙酸溶液（2.0mol/L）：取115mL乙酸（4.4），加人700mL水，混匀后用水定容至11.
刻度.乙酸钠溶液（4.13.2）混合均匀.4.14磷酸盐缓冲液.4.14.1磷酸氢二钠溶液（0.1mol/L)：称取14.20g无水磷酸氢二钠（4.2），溶于水，移人1000mL容量 瓶中，稀释至刻度.4.14.2磷酸二氢钠溶液（0.1mol/L)：称取13.80g磷酸二氢钠（4.3），溶于水，移人1000mL容量瓶中，稀释至刻度.4.14.30.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH≈7）：将61mL0.1mol/L磷酸氢二钠溶液（4.14.1)与39mL0.1mol/L磷酸二氢钠溶液（4.14.2）混合均匀.
4.15蛋白酵溶液：
称取5.00g蛋白酶（4.9），溶解于100mL磷酸盐缓冲液（4.14.3）中，混合15min，在1500×g离心10min，然后用含有玻璃棉（4.12）的玻璃坩竭过滤.每日制备并冷藏，于0°C～5C冰箱保存.酶的活性及判定标准见附录A.
4.16a-淀粉酶溶液：
称取5.00ga-淀粉酶（4.10）溶娜于100mL磷酸盐缓冲液（4.14.3）中，混合15min.1500×g离心10min，然后用含有玻璃棉（4.12）的玻璃坩蜗过滤.每日制备并冷藏，于0C~5C冰箱保存.酶的活性及判定标准见附录A.
4.17淀粉葡萄糖苷酵：
称取5.00g淀粉葡萄糖苷酶（4.11），溶娜于100mL磷酸盐缓冲液（4.14.3）中，混合15min.在1500×g离心10min，然后用含有玻璃棉（4.12）的玻璃坩埚过滤.每日制备并冷藏，于0℃～5C冰箱保存.酶的活性及判定标准见附录A.
4.1880%乙醇溶液：
取800mL无水乙醇（4.5），置1L容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀.
4.19氢氧化钠溶液（1mol/L）：
称取4.00g氢氧化钠（4.7），溶于水，移人100mL容量瓶中，稀释至刻度.
取8.3mL盐酸（4.8），置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀.
5仪器和设备
5.1试验用粉碎机：可保证将样品粉碎至全部通过20目筛.5.2分析天平：感量0.01g、0.0001g. 5.3烘箱：105C±2℃C.5.4马弗炉：525C土5C5.5水浴锅：100C±1C5.6高压灭菌器.5.8具塞三角瓶：250ml. 5.7酸度计.5.9具塞磨口试管：50ml.5.10坩埚式耐热玻璃滤器：容量60mL，孔径40μm.坩埚预处理：于耐热玻璃滤器中.铺1g~3g玻5.11回流冷凝装置. 璃棉（4.12），移至烘箱内，105℃烘4h，取出置干燥器中冷却至室温，备用.2
5.12抽滤装置：由抽滤瓶、抽滤垫及水泵组成.
6分析步骤
6.1试样制备
取适量试样磨粉，全部过孔径为1mm（20目）的筛，混匀.置于样品盒中室温保存.
6.2试样测定
6.2.1称样
准确称取试样0.5g（精确至0.0001g），置50mL具塞磨口试管中.如果试样的脂肪含量超过10%，则需要先脱脂再进行测定.
6.2.2水解
加人2mL缓冲溶液（4.13.3），混匀，置于120C1.3×10Pa高压灭菌器中水解60min.
6.2.3淀粉酶酶解
加人100μLα-淀粉酶溶液（4.16），加塞，置于60℃±1℃水浴锅中酶解消化30min，然后将经过酶处理的试样倒人玻璃滤器中，抽滤，用50mL试管收集滤液，用10mL热水冲洗涉器，将残留颗 粒无损失地转移至滤器中，再用5mL热水冲洗坩埚，洗液并人上述滤液.
6.2.4调整pH
在滤液中加人4mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液（4.13.3）.用氢氧化钠溶液（4.19）或盐酸溶液（4.20），调滤液pH至5.2.
6.2.5淀粉葡萄糖昔酶酶解
加人50gL淀粉葡萄糖苷酶（4.17），搅拌均匀，加塞，置于60C士1C水浴锅中酶解消化30min
6.2.6蛋白酶解
加人20μL蛋白酶溶液（4.15），搅拌均匀，加塞，置于60℃土1C水浴锅中酶解消化30min.
6.2.7沉淀
塞，静置60min，促使沉淀生成. 将滤液转移至250mL三角瓶中，加人无水乙醇（4.5），使乙醇与试样液的体积比为411，混匀.加
6.2.8洗涤
将经过沉淀处理的试液倒人处理后玻璃滤器中，抽滤，用80%的乙醇溶液（4.18）清洗三角瓶，将残留颗粒无损失地转移至滤器中，用20ml80%的乙醇溶液清洗滤渣2次，20mL的丙酮清洗2次， 弃去滤液.
6.2.9烘干
0 000 1 g) - 将玻璃滤器置于105C土2℃烘箱内烘干3h，取出，置于干燥器中，冷至室温，称量m（精确至
