团 体标 示准
T/CCP1A288-2026
枸杞木虱抗药性监测技术规程
Technical code of practice for insecticide resistance monitoring in Bactericera gobica
(Loginova)
中国农药工业协会 发布
前言
起草. 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中国农药工业协会提出并归口.
本文件起草单位：中国医学科学院药用植物研究所、中国农业大学、中国农业科学院植物保护研究所、玺赞庄园枸杞有限公司、宁夏农林科学院植物保护研究所.
刘畅、王芳、徐荣、吴鸿洋、赵士文、梁睿. 本文件主要起草人：魏红爽、徐常青、刘赛、谭树乾、乔海莉、郭昆、郑永权、潘兴鲁、高贵武、
枸杞木虱抗药性监测技术规程
1范围
本文件规定了枸杞木虱[Bactericera gobica（Loginova刀抗药性的监测方法、抗药性水平评估及监测档案管理.
本文件适用于枸杞木虱对常用杀虫剂的抗药性监测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T1154.6农药室内生物测定试验准则第6部分：杀虫活性试验浸虫法 NY/T1154.1农药室内生物测定试验准则第1部分：触杀活性试验点滴法NY/T1667.3农药登记管理术语第3部分：农药药效NY/T4181草地贪夜蛾抗药性监测技术规程
3术语和定义
NY/T1667.3界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
叶片浸渍法pest dippingmethod
将带有供试昆虫的植物叶片浸渍在药液中，使昆虫通过接触药液和带毒叶片的生物测定的方法.[来源：NY/T1154.6和NY/T 4181]
3.2
点滴法topical application method
用微量点滴装置点滴药液于昆虫的前胸背板上，使昆虫接触药液的生物测定的方法.[来源：NY/T1154. 1和INY/T 4181]
4供试材料
4.1监测对象
经室内饲养1代~2代、龄期一致的枸杞木虱4龄若虫.
4.2供试植物
未接触任何药剂处理的室内培育的构杞幼苗.
4.3供试药剂
试验药剂采用原药，并注明通用名、含量、生产厂家.
4.4试验试剂
TritonX-100：丙酮、二甲基亚矾、二甲基甲酰胺等（对于不易溶解的药剂，可添加其他助溶剂）：的试剂均为分析纯，水为蒸馏水.
5仪器设备
5.1试验仪器
天平：分度值为0.01g和0.0001g.体视显微镜：拥有8x和35x放大倍数.毛细管微量点滴器：点滴量范围为0.03ul~3.5uL. 人工气候培养箱：工作条件为光照周期16h：8h（光：暗）、温度（25土1）°C、相对湿度70%~80%.
5.2试验器材
塑料培养m：直径9cm.玻璃烧杯：容量10ml、25mlL、100mL和500mL.塑料离心管：50mlL和15ml. 量筒：100mL和500ml.移液器：容积5mL、1ml、100μuL和20ul.容量瓶：50 ml、100mL和 200 mL. 移液管.
6试验步骤
6.1试材准备
6.1.1枸杞苗的培育
将枸杞籽播种到装好营养土的托盘里，放入人工气候培养箱里培育10d~14d后备用..
6.1.2试虫采集
选择监测地区具有代表性的枸杞地3块~5块，每块地按5点随机取样方法，采集生长发育较一致的枸杞木虱若虫，每地块采集若虫1000头以上，带回室内饲养，建立供试种群.
6.2试虫饲养
下连续饲养1代~2代，用于抗药性测定. 田间采集的枸杞木虱若虫转移到室内枸杞苗上，放入人工气候培养箱里饲养.无任何药剂接触条件
6.3药剂配制
用天平准确称取一定量的原药，用丙酮等有机溶剂溶解，配制成一定浓度的母液.用移液器吸取一定量的母液到玻璃烧杯中，用0.05%TritonX-100的水溶液按照等比梯度设置5-8个系列浓度.每个浓度的药液量不少于50mL.
6.4药剂处理
6.4.1叶片浸渍法
棉包裹保湿，放入铺有干净滤纸的塑料培养皿里，放入人工气候培养箱里饲养.按照配置好的浓度由低 将带有若虫的枸杞叶片，分别浸入配制好的不同浓度药液中，20s后取出晾干，叶柄用浸水的脱脂到高的顺序重复上述操作.每个处理重复4次，每个重复若虫不少于20头，设置不含药剂的处理作为空白对照.
6.4.2点滴法
鲜枸杞叶片的培养皿里饲养，叶柄用浸水的脱脂棉包裹保湿，放入人工气候培养箱里饲养.按照配置好 用毛细微量点滴器点滴于4龄若虫的前胸背板上，每头点滴0.05uL.将点滴后的若虫转入装有新的浓度由低到高的顺序重复上述操作.每个处理重复4次，每个重复若虫不少于20头，设置不含药剂的点滴处理作为空白对照.
7结果检查
7.1叶片浸渍法
2
T/CCP1A
药剂在处理24h后，检查并记录若虫死亡情况，在体视显微镜下用毛笔轻触若虫无反应或有明显的中毒症状（不取食或抽搐等）则视为死亡.
7.2点滴法
的药剂在处理24h后，检查并记录若虫死亡情况，在体视显微镜下用毛笔轻触若虫无反应或有明显的中毒症状（不取食或抽描等）则视为死亡.
8数据统计与分析
8.1死亡率计算方法
计算各处理的校正死亡率.若对照死亡率20%，试验需重做：对照死亡率在10%~20%，应按公式（1）和（2）进行校正，计算结果均保留到小数点后2位.
(1)
式中：
P一一死亡率，单位为百分率（%）：
一表示处理总虫数，单位为头：
K表示死亡虫数，单位为头.
100Ps (2)
式中：
P2 校正死亡率，单位为百分率（%）：P-对照死亡率，单位为百分率（%）； P 处理死亡率，单位为百分率（%）：
8.2回归方程和致死中浓度（LC）或致死中量（LD）的计算方法
采用PoloPlus等统计软件进行数据统计分析，计算每种药剂的LC或LD及其95%置信限、斜率（b）及其标准误、卡方和自由度.
9抗药性水平的计算与评估
9.1枸杞木虱对部分杀虫剂的相对敏感基线
参见附录A.
9.2抗药性倍数的计算
根据相对敏感基线和测试种群的LC或LD值，按公式（3）计算测试种群的抗药性倍数.
(C)-
式中：
RR-测试种群的抗药性倍数：T-测试种群的LC或LD
S-相对敏感种群的LC或LD.
9.3抗药性水平的评估
出评估. 根据抗药性倍数的计算结果，按照表1中害虫抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药性水平做
