SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1119-2002 进口动物源性饲料中牛羊源性 成分检测方法 PCR方法 Identification of bovine ,sheep and goat derived materials in import animal derived feedstuff -PCR method 2002-05-20发布 2002-11-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局
SN/T 1119-2002 目次 前言 引言 IV 1 范围 2 术语、定义和缩略语 3 抽样和制样 2 4 测定方法 结果及判断 6 废弃物处理和防止污染的措施 附录A（规范性附录） 确证试验一PCR扩增产物测序 附录B(规范性附录） 检测过程中防止交叉污染的措施 参考文献
SN/T1119-2002 前 市言 本标准的附录A、附录B为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中国进出口商品检验技术研究所、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华 人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。
本标准主要起草人：徐宝梁、杨宝华、王静、曹际娟、薄清如。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN/T1119-2002 1E 言 牛海绵状脑病、痒病均可通过食用病畜组织传播，所以含牛羊源性成分的动物源性饲料的使用，一 直被认为是牛海绵状脑病、痒病得以传播的主要途径。
禁止疫区含牛羊源性成分的动物源性饲料的生 产、流通和使用，也就成为防止牛海绵状脑病、痒病感染、流行的主要手段。
根据牛羊遗传物质的特异性，应用PCR方法，可以检测动物源性饲料中牛羊源性成分。
本方法的测 定低限为0.125%。
IV
SN/T1119-2002 进口动物源性饲料中牛羊源性 成分检测方法PCR方法 1范围 本标准规定了进口动物源性饲料中牛羊源性成分检测的抽样、制样、PCR方法、限制性内切酶酶切 反应方法。
本标准适用于动物源性饲料中牛羊源性成分的定性检测。
2术语、定义和缩略语 下列术语、定义和缩略语适用于本标准。
2.1 动物源性饲料animalderivedfeedstuff 含有动物成分的饲料。
2.2 牛源性成分bovinederivedmaterial 牛特异性DNA片段。
2.3 羊源性成分sheepandgoatderivedmaterial 羊特异性DNA片段。
2.4 聚合酶链式反应polymerasechainreaction 聚合酶链式反应，简称PCR。
使用两段（20个～24个核苷酸）寡核苷酸作为反应的引物，这两段寡 核苷酸引物的序列应不发生互补作用。
但它们可和称为模板的待测DNA两条链上在一定的位点分别 发生互补。
反应液由包括含有镁离子的反应缓冲液、4种单核苷酸（dNTP）、模板DNA及引物。
在DNA 聚合酶催化下，通过温度的变化（DNA变性、退火及延伸）而合成两个互补位点之间的DNA片断。
这样 的反应反复进行，使第一个循环产生的DNA片断得以扩增。
经25个～30个循环，扩增倍数达10°。
2.5缩略语 PCR:polymerasechain reaction，简称PCR。
DNA：deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸。
dNTP：deoxyribonucleosidetriphosphate，脱氧核苷酸三磷酸。
dATP：deoxyadenosinetriphosphate，脱氧腺苷三磷酸。
dCTP：deoxycytidinetriphosphate，脱氧胞苷三磷酸。
dGTP：deoxyguanosinetriphosphate，脱氧鸟苷三磷酸。
dTTP：deoxythymidinetriphosphate，脱氧胸苷三磷酸。
dUTP：deoxyuridinetriphosphate，脱氧尿苷三磷酸。
UDG：uracilDNAglycosylase，尿嘧啶DNA-糖基酶。
bp:basepair，碱基对。
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