ICS65.020.30 B41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T37115-2018 鲍疱疹病毒病诊断规程 Protocol of diagnosis for infection with abalone herpersvirus 2018-12-28发布 2019-07-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T37115-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任. 本标准由中华人民共和国农业农村部提出. 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口. 本标准起草单位：深圳市检验检疫科学研究院、全国水产技术推广总站、中华人民共和国深圳海关. 本标准主要起草人：王津津、李清、余卫忠、刘荭、刘莹、史秀杰、郑晓聪、何俊强、于力、贾鹏、兰文升. I GB/T37115-2018 鲍疱疹病毒病诊断规程 1范围 本标准给出了鲍疱疹病毒病的临床症状，规定了鲍疱疹病毒病组织病理学检测方法、实时荧光聚合 酶链式反应检测方法、聚合酶链式反应检测方法. 本标准适用于鲍疱疹病毒病的流行病学调查、监测、诊断和检疫. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3缩略语 下列缩略语适用于本文件. AbHV:鲍疱疹病毒(Abalone Herpesvirus) CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(Cetyltrimethyl Ammonium Bromide) Ct值：循环阈值(Cycle threshold) EB:溴化乙锭(Ethidium Bromide) EDTA:乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid) PCR:聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) qPCR:实时荧光聚合酶链式反应(quantitative real-time Polymerase Chain Reaction) 4试剂和材料 4.1若非注明，本标准所用生化试剂均为分析纯的试剂. 4.2若非注明，试验用水应符合GB/T6682一级水的规格. 4.3Taq酶及10倍Taq酶浓缩缓冲液；Taq酶浓度为5U/uL 一20℃保存，避免反复冻融. 4.4 dNTPs:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmoL/L. 4.5qPCR引物和探针： AbHV ORF66F1:5-CCCGGACACCAGTAAGAAC-3' AbHV ORF66R1:5-AGGCTGCTATGCGTATGA-3' 探针(AbHV66Prb1):5'-6FAM-TGGCCGTCGAGATGTCCATG-TAMRA-3' 扩增ORF66基因长度146bp片段，用于荧光PCR.(参见附录A) AbHV ORF77F1:5'-AACCACTTGTTCGGGTTCT-3' AbHV ORF77R1:5'-AGGGTGATTAATGCGGAGT-3 1 ...
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