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KJ 食品快速检测方法 KJ202304 动物源性食品中红霉素、螺旋霉素、 泰乐菌素、替米考星的快速检测 胶体金免疫层析法 2023-06-13发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202304 动物源性食品中红霉素、螺旋霉素、 泰乐菌素、替米考星的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了动物源性食品中红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替米考星的胶体金免疫层析快速检测 方法. 本方法适用于牛奶、鸡蛋以及鸡肉、猪肉和牛肉等动物肌肉组织中红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替 米考星的快速定性检测. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.鸡蛋和动物肌肉组织试样中红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替 米考星经样品提取液提取，并经样品稀释液稀释后（牛奶试样直接用样品稀释液稀释），与胶体金标记的 特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条中硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合，从而导致试纸条检测 线(T线)颜色变化.通过检测线(T线)与控制线(C线)颜色深浅比较，对试样中红霉素、螺旋霉素、泰 乐菌素、替米考星进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2磷酸二氢钾(KH2PO4). 3.1.3磷酸氢二钠(Naz HPO4). 3.1.4氯化钾(KC1). 3.2试剂配制 3.2.10.5mol/L磷酸盐缓冲液：称取磷酸二氢钾(3.1.2)13.5g 磷酸氢二钠(3.1.3)56.8g 氯化钾 (3.1.4)10.0g 用水溶解并定容至1000mL. 3.2.220mmol/L磷酸盐缓冲液（样品稀释液）：准确量取0.5mol/L磷酸盐缓冲液(3.2.1)40mL 用水 定容至1000mL. 3.2.3样品提取液：准确量取甲醇(3.1.1)50mL和20mmol/L磷酸盐缓冲液(3.2.2)50mL 混匀. 3.3参考物质 红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替米考星参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子 质量见表1，纯度≥98%. 注：或等同可溯源物质. 1 KJ 202304 表1红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替米考星参考物质的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、 相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 相对分子质量 红霉素 Erythromycin 114-07-8 Cs Har NO13 733.94 螺旋霉素 Spiramycin 8025-81-8 Cu 843.05 泰乐菌素 Tylosin 1401-69-0 ::NO? 916.10 替米考星 Tilmicosin 108050-54-0 C.Hs N2 Ots 869.15 3.4标准溶液配制 3.4.1标准储备液(1.0mg/mL):精密称取红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替米考星参考物质(3.3)各 50mg(精确至0.01mg) 分别用甲醇(3.1.1)溶解并定容至50mL棕色容量瓶中，摇匀.红霉素、泰乐 菌素、螺旋毒素、替米考星标准储备液于一20℃以下避光保存，有效期3个月. 3.4.2标准中间液(100g/mL):准确量取红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、替米考星标准储备液(3.4.1) 各5.0mL 分别置于50mL棕色容量瓶中，用甲醇(3.1.1)定容，摇匀.4℃以下避光保存，有效期 1个月. 3.4.3标准工作液（红毒素、螺旋霉素、泰乐菌素分别为10g/mL 替米考星为1.0μg/mL):准确量取 红毒素、螺旋霉素、泰乐菌素标准中间液(3.4.2)各1mL和替米考星标准中...