NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1857.4-2010
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程
Rules for evaluation of cucumber for resistance to diseasesPart 4:Rule for evaluation of cucumber forresistance to phytophthora blight
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1857-2010《黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准，共8部分：
第1部分：黄瓜抗霜霉病鉴定技术规程；第2部分：黄瓜抗白粉病鉴定技术规程；-第3部分：黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程； 一第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程；第5部分：黄瓜抗黑星病鉴定技术规程；第6部分：黄瓜抗细菌性角斑病鉴定技术规程；第8部分：黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程. 一第7部分：黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；本部分为NY/T1857-2010的第4部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口.本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所. 本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、粪慧芝.
第4部分：黄瓜抗疫病鉴定技术规程 黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程
1范围
抗病性评价和鉴定记载表格. 本部分规定了黄瓜抗疫病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设计、接种、病情调查、本部分适用于各种黄瓜资源对黄瓜疫病抗性的室内鉴定及评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1抗病性disease resistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
2.2抗病性鉴定identification of disease resistance 通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平.
2. 3抗性评价evaluation ofresistancelevels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述.
2.4 致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力.
2.5人工接种artificialinoculation在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程.
2.6病情级别diseaserating scale人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2.7采用人工方法从植物发病部位分离获得的在特定环境条件下培养的病原物. 病原分离物pathogenicisolate
2.8培养基culturemedium可以使病原物生长的自然或人工配制的基质.
2.9 接种体inoculum用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
2. 10
NY/T 1857.4-2010
接种悬浮液inoculumsuspension
用于接种的含有定量接种体的液体.
2. 11
病情指数disease index（DI）
通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.
2. 12
黄瓜疫病Cucumberphytophthorablight
由甜瓜疫霉[PhytophthoramelonisKatsura]所引起的造成叶片萎蓄或全株枯死症状为主的黄瓜病害.
3接种体制备
3.1病原物分离
从发病植株叶片、蒸或果的病组织上用常规组织分离法分离疫病病原物.分离物经形态学鉴定确认为甜瓜疫霉[PhytophthoramelomisKatsura]后，进行分离物纯化，经致病性测定后，保存备用.
3.2接种体繁殖和保存
在接种前需要进行病原物接种体的繁殖.常用的繁殖方法为：将菌株培养在V8培养基上、于（25士1）℃下光照培养7d，待平板上产生大量孢子囊后加人无菌水，用玻棒或毛笔刮动平板培养基表面收集菌丝和孢子囊，再将培养物置于室温（22℃～24℃）下30min诱发游动孢子的形成和释放，随后用取PDA平板上的菌丝块针刺接种于黄瓜瓜条上，培养5d待病果长满厚厚的菌丝时，切成3cm长的小 两层纱布过滤后即得孢子悬浮液：或将经复壮的黄瓜疫霉病菌经PDA培养基平板培养3d~5d后，挑条浸人100mL~150mL自来水中，25C光照培养24h后去瓜条，即为孢子悬浮液.用蒸缩水稀释滤液至所需接种浓度供接种用.
箱内保存：或在斜面上加一层灭菌矿物油（超过斜面顶部1cm）后置冰箱或室温下保存. 将黄瓜疫霉病菌接种于PDA斜面培养基上，在22C～25C的恒温箱中培养7d后，置4℃~8C冰
4室内抗性鉴定
4.1鉴定室设置
人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境.
4.2鉴定对照品种
鉴定时设“长春密刺”黄瓜为抗病对照品种，津研2号"黄瓜为感病对照品种.
4.3鉴定设计
鉴定材料随机或顺序排列，每份材料重复3次，每重复10株苗.
4.4鉴定材料育苗
鉴定材料种子经5%次氯酸钠溶液浸种10min后，用清水冲洗，放人垫有两层滤纸的培养皿中，然后于恒温培养箱中28℃催芽.待胚根长至0.5cm时，将其播于装有播种基质的塑料育苗体内.育苗基质为草炭、蛭石和菜田土（2：1：1），基质经高温蒸汽灭菌（134℃，30min）.在20℃~25C的日光温室内育苗，幼苗应生长健壮、一致.
4.5接种
4.5.1接种期
黄瓜疫病抗性鉴定接种期为2~3叶期.
4.5.2接种浓度
约5×10²个游动孢子/mL.
2
NY/T 1857.4-2010
4.5.3接种方法
接种采用滥根接种法.接种前浇透水，取2mL接种悬浮液加到植株根部周围，注意不要使菌液直接接触植株根颈或茎部.
4.6接种后管理
接种后将植株置于鉴定室内黑暗保湿（RH为100%）24h，以后每天光照14h，保持土壤湿度近饱和，接种期间温度控制在24℃～28℃范围内.
5病情调查
5.1调查时间
病情调查于接种后7d~10d进行.
5.2调查方法
调查每份鉴定材料接种株发病情况，根据病害症状描述，逐份材料进行调查，记载病情级别，计算出病情指数(DI).
病情指数按公式（1）计算：
∑(s×n)DI = NXS ×100 (1)
式中：
DI--病情指数；5-各病情级别代表数值； 各病情级别病株（叶）数；N-调查总株（叶）数； n-S-最高病情级别代表值.
5.3病情分级
室内病情分级及其对应的症状描述见表1.
表1黄瓜疫病病情级别划分
病情缓别 症状摧述0 1 无症状 蒸基部水浸状，稍变黄，叶片不萎薄2 基基部水浸状扩展型病斑超过2cm，稍举缩，或子叶萎3 4 植株萎死亡 基基部病斑超过3cm，或茎部墙增明显，真叶出现萎瘤
6抗性评价
6.1鉴定有效性判别
当感病对照材料达到其相应感病程度（DI>50），该批次抗疫病鉴定视为有效.
6.2抗性评价标准
依据鉴定材料的发病程度（病情指数）确定其对疫病的抗性水平，划分标准见表2.
表2黄瓜对疫病抗性评价标准
病情指数 抗性评价0<DI≤10 高抗（HR)10<DI≤25 杭病（R）
