中华人民共和国国家标准
大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法
Detection and identification of Diaporthe caulivora（Athow&Caldwell）Santos，Vrandecic & Phillips and Diaporthe aspalathi E.Janse，Castl.& Crous
国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口.
本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、杭州海关技术中心、黄埔海关技术中心、南京海关动植物与食品检测中心、思茅海关综合技术服务中心、宁波检验检疫科学技术研究院、武汉海关技术中心.
本文件主要起草人：吴品珊、雷荣、陈吴健、张海鹏、李彬、周剑、孙夕雯、杨藜、段维军、华丽、王振华.
大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法
1范围
本文件描述了大豆北方茎溃疡病菌 Dia porthe caulizora（Athow &.Caldwell）Santos，Vrandecic&.Phillips 和大豆南方茎溃疡病菌Diaporthe aspalarhi E.Janse，Castl. &. Crous 的分离培养、形态学 鉴定和分子生物学检测方法.
本文件适用于大豆籽粒以及大豆植株中的大豆茎溃疡病菌的检疫鉴定和监测.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
重组商聚合薛扩增rebinase polymerase amplification;RPA
重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶等多酶在37C～42C之间的恒温条件下共同作用对DNA进行恒温扩增的一种核酸扩增技术.
4病菌的基本信息
学名：Dia porthe caulivora（Athow &.Caldwell)Santos，Vrandecic &Phillips(大豆北方茎溃疡病菌）、Dia porthe aspalazhi E. Jansen Castl. &. Crous(大豆南方茎溃疡病菌）.
英文名：soybean stem canker.
分类地位：真菌界（Fungi），子囊菌门（Asycota），粪壳菌纲（Sordariomycetes），间座壳菌目（Di-aporthales），间座壳菌科（Diaporthaceae），间座壳属（Dia portheNits.），无性阶段为拟茎点霉(Phomopsis spp.)
5方法原理
依据病害症状、分离菌的形态特征和分子生物学特性，以特异性引物常规PCR、实时荧光PCR扩增和重组酶聚合酶扩增（RPA）特异性片段的原理，对病菌进行综合检疫鉴定.
