NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T4687-2025
Determination of propionic acid and propionate in preservatives asfeedadditive blender-High performance liquid chromatography
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国农业农村部畜牧兽医局提出.
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口.
本文件起草单位：四川威尔检测技术股份有限公司、江西省农业技术推广中心、重庆民泰新农业科技发展集团有限公司、通威农业发展有限公司.
本文件主要起草人：张风秤、张艳红、唐姣、杨发树、万文根、杨梅、符金华、张璐、陶有伦、夏骏、侯玲玲.
混合型饲料添加剂防霉剂中丙酸和丙酸盐 的测定高效液相色谱法
1范围
本文件描述了混合型何料添加剂防霉剂中丙酸和丙酸盐的高效液相色谱测定方法.本文件适用于混合型何料添加剂防霉剂中丙酸和丙酸盐的测定.本文件丙酸和丙酸盐的检出限为0.1%，定量限为0.3%.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中的丙酸和丙酸盐用磷酸溶液提取，高效液相色谱仪测定，外标法定量.
5试剂或材料
5.1水：GB/T6682规定的一级水， 除非另有规定，仅使用分析纯试剂.5.2乙睛：色谱级.5.30.1%磷酸溶液：移取1.0mL磷酸，加水稀释、定容至1000mL，混匀，备用.5.4标准储备溶液（10mg/mL）：称取约0.5g（精确至0.1mg）丙酸标准品（CAS号：79-09-4，纯度≥5.5标准系列溶液：准确移取0.1mL、0.2mL、0.5mL.1.0mL、2.0mL、5.0mL标准储备溶液（5.4），分别 99.0%）于50mL容量瓶中，用0.1%磷酸溶液（5.3）溶解，定容，混匀.于2C~8C保存，有效期3个月.置于100mL容量瓶，用0.1%磷酸溶液（5.3）稀释、定容，混匀.配制成质量浓度分别为0.01mg/mL、0. 02 mg/mL、0. 05 mg/mL、0. 1 mg/mL、0. 2 mg/mL、0. 5 mg/mL 标准系列溶液.临用现配.5.6微孔滤膜：0.45μm，水系.
6仪器设备
6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器.6.2分析天平：精度为0.1mg.6.3超声波清洗器.
7样品
取代表性的样品200g，尽快装人耐酸、耐腐蚀的容器中，立即密封，尽快分析.
8试验步骤
8.1试样溶液制备
8.1.1固体型
平行做2份试验，称取0.5g（精确至0.1mg）试样，置于100mL容量瓶中，立即加入80mL0.1%磷酸溶液（5.3），加塞，摇匀，超声提取10min，取出，冷却至室温用0.1%磷酸溶液（5.3）定容，混匀.准 确移取10mL提取液于100mL容量瓶中.用0.1%磷酸溶液（5.3）稀释、定容，混匀，过微孔滤膜（5.6），备用.
8.1.2液体型
平行做2份试验.称取约0.5g（精确至0.1mg）试样，置于100mL容量瓶中，立即用0.1%磷酸溶液（5.3）稀释、定容，混匀.准确移取10mL提取液于100mL容量瓶中，用0.1%磷酸溶液（5.3）稀释、定 容，混匀，过微孔滤膜（5.6），备用.
8.2测定
8.2.1高效液相色谱参考条件
高效液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：C柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5pm，或性能相当者； b）流动相：乙晴（5.2）0.1%磷酸溶液（5.3）=595；c）流速：1.OmL/min；d）检测波长：210nm；e）进样量：20p；f）柱温：30℃.
8.2.2标准系列溶液和试样溶液测定
在仪器的最佳条件下，分别取标准系列溶液（5.5）和试样溶液（8.1）上机测定，丙酸标准溶液的液相色谱图见附录A.
8.2.3定性
峰的保留时间一致，其相对偏差在士2.5%之内. 以保留时间定性，试样溶液中丙酸色谱峰的保留时间应与质量浓度相当的标准系列溶液中丙酸色谱
8.2.4定量
以丙酸的质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其相关系数应不低于0.999.试样溶液中丙酸的质量浓度应在标准曲线的线性范围内，如超出范围，应将试样溶液用0.1%磷酸溶液（5.3）稀释后重新测定.单点校准定量时试样溶液中待测物的质量浓度与标准溶液质量浓度相差不超过 30%.
9试验数据处理
试样中丙酸和丙酸盐（以丙酸计）的含量w以质量分数计，单位为百分含量（%）.多点校准按公式（1）计算，单点校准按公式（2）计算.
式中：
由标准曲线计算得到的试样溶液中丙酸质量浓度的数值，单位为毫克每毫升（mg/mL)；P V 试样提取溶液总体积的数值，单位为毫升（mL）；V. 试样溶液体积的数值，单位为毫升（mL）；一超出线性范围后的稀释倍数；V. 移取提取溶液体积的数值，单位为毫升（mL）； 试样质量的数值，单位为克（g）：1000换算系数.
