中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
含脂类辐照食品鉴定 2-十二烷基环丁酮的气相色谱- 质谱分析法
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局 发布
前言
本标准与GB/T21926-2008相比，主要变化如下： 标准名称修改为“食品安全国家标准含脂类辐照食品鉴定2-十二烷基环丁酮的气相色谱-质谱分析法”；改进了硅胶柱层析法.
食品安全国家标准
含脂类辐照食品鉴定 2-十二烷基环丁酮的气相色谱- 质谱分析法
1范围
本标准规定了利用2-十二烷基环丁酮鉴定含脂辐照食品的气相色谱-质谱分析法.本标准适用于脂肪含量大于1%的辐照食品的鉴定.
2原理
采用正已烷将样品中的脂肪和2-十二烷基环丁酮一起萃取出来，经硅胶层析柱净化、浓缩后，用气相色谱-质谱仪测定2-十二烷基环丁酮，外标法定量.
3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水.
3.1试剂
3.1.1正已烷（CH）.3.1.2无水硫酸钠（NaSO ）：650C灼烧4h，干燥器中冷却保存备用.3.1.3乙醚（CHO）.3.1.4氮气（N）：纯度≥99.999%.
3.1.5氮气（He）：纯度≥99.999%.
3.2材料
具塞锥形瓶中加人4%（质量比）水去活化，摇动锥形瓶至硅胶分散均匀.将去活化的硅胶于干燥器中 硅胶：250μm~500μm，柱层析用.使用前，将硅胶置于100C烘箱活化12h.干燥器中冷却.于平衡12h，一周内可用.
3.3标准品
2-十二烷基环丁酮标准品（CHO）：纯度≥99%.
3.4标准溶液配制
3.4.12-十二烷基环丁酮标准储备溶液
准确称取适量2-十二烷基环丁酮标准品（精确至0.1mg）用正已烷溶解，配制成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，一20C贮存，3个月内有效.
3.4.22-十二烷基环丁酮标准工作溶液
pg/mL.2.50μg/mL.5.00μg/mL的各级标准工作溶液，一20C存，1个月内有效，但出现谱峰异常时 用正已烷稀释标准储备溶液（100μg/mL）.分别配制成0.10μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、1.00应考虑重新配制.
4仪器和设备
4.1气质联用仪：配备弱极性（如DB-5）或适当性质和规格的毛细管柱，柱长：30m，内径：0.25mm.膜厚：0.25 μm.4.2索氏提取器.4.3氮吹仪. 4.4电动搅拌机.4.5恒温干燥箱.4.6恒温水浴锅.4.8电子天平：感量0.1mg. 4.7旋转蒸发仪.4.9玻璃层析柱：柱长：200mm~300mm，内径：20mm.
5分析步骤
5.1试样制备
用电动搅拌机绞碎并混匀，置于密闭玻璃管中或金属箔内. 选取样品中带脂肪的部位，牛肉、猪肉等固体样品切成小块，鸡蛋等液态样品应干燥至半固体状.
5.2脂肪提取
后用脱脂棉塞住管口，向索氏提取器中加人100mL正已烷，将抽提套管放人提取器中，再加人40mL 称取20g无水硫酸钠和20g样品（可根据样品脂肪含量适当调整）放人纤维材质抽提套管中，混合正已烷，以约1h虹吸4次的速度，加热回流萃取6h.
收集全部脂肪提取液，旋转蒸发浓缩至2mL~3mL（45C水浴，约25kPa）.将浓缩后的脂肪转移至具塞玻璃管中，氮吹浓缩至恒重.
5.3硅胶柱层析
在玻璃层析柱中填充30g去活化的硅胶，硅胶顶部盖上1cm厚的无水硫酸钠，用2倍柱体积的正已烷预淋洗.称取5.2中制备的1.0g脂肪，溶于5mL正已烷，上柱.先用150mL正已烷淋洗，流速控制在2mL/min，弃去淋洗液.再用480mL含有1%乙醚的正已烷溶液洗脱，弃去先流出的230mL洗 脱液，收集剩下的洗脱液，于40C水浴将洗脱液旋转蒸发浓缩至2mL～5mL.浓缩液转移至10mL试管中，用2mL～5mL正已烷洗涤旋转蒸发瓶两次，洗涤液合并至试管中.于40C氮气吹至近干.用正已烷定容至0.5mL，转入进样瓶待测.
5.4仪器参考条件
a）色谱柱升温程序：120C保持1min，然后以15C/min升温至160℃：再以0.5C/min至175℃：再以30C/min至290C，保持10min，检测器温度250℃；
b）进样口温度：250℃；c）接口温度：280℃；e）测定方式：选择离子检测（SIM）；监测离子（m/x）：55、98、112，定量离子（m/x）：98； d）离子源：EI源，70eV：f）载气：氮气，流速1.0mL/min：g）进样量：1.0gzL:h）进样方式：不分流进样.
6分析结果的表述
对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，外标法定量.在上述色谱条件下，2-十二烷基环丁酮标准样品的选择离子色谱图见图A.1.2-十二烷基环丁酮的保留时间约为17.1min，质谱图见图A.2.
时间一致（相对偏差≤2s)，其质谱图与2-十二烷基环丁酮标准的质谱图基本一致，扣除背景后选择监 若样液中检出的2-十二烷基环丁酮色谱峰的保留时间与2-十二烷基环丁酮标准的色谱峰的保留测离子m/z55、98和112均出现，且m/z55、112与基峰m/98的相对丰度比与2-十二烷基环丁酮标准的相对丰度比的偏差不超过20%，则可确证样品中检出2-十二烷基环丁酮，表明该样品接受过辐照处理.
