GB
中华人民共和国国家标准
代替SN/T2795-2011
GB 23200.69-2016
食品安全国家标准 食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定 液相色谱一质谱/质谱法
National food safety standards -
Determination of dinitroaniline pesticides residue in foods
Liquid chromatography - mass spectrometry
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
质谱法》. 本标准代替SN/T2795-2011《进出口食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定液相色谱一质谱/串联
本标准与SN/T2795-2011相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：，日，中 一标准范围中增加“其它食品可参照执行”.本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 2795-2011.
食品安全国家标准
食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定
液相色谱一质谱/质谱法
1范围
本标准规定了食品中8种二硝基苯胺类农药残留量的液相色谱-质谱/质谱法检测方法.
本标准适用于黄豆、大米、菠菜、生姜、苹果、西瓜、甘蓝、节瓜、茶叶、鸡蛋、猪肉和鸡肝中氟留量的测定和确证：其它食品可参照执行. 乐灵、二甲戊灵、氨磺乐灵、仲丁灵、氨氟乐灵、氨氟灵、甲磺乐灵和异丙乐灵等二硝基苯胺类农药残
2规范性引用文件
文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试样用乙晴振荡提取，石墨化碳黑固相萃取柱和HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法仪测定和确证，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.4.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.4.1.3正已烷（CgHa）：色谱纯. 4.1.4甲酸（CHO）：色谱纯.4.1.5丙酮（CHO）：优级纯.4.1.7无水硫酸钠（NaSO）：分析纯，用前经650C灼烧4h，置干燥器中备用. 4.1.6氯化钠（Nacl）：分析纯.
4.2溶液配制
4.2.1乙晴-水溶液（11，含0.05%甲酸）：量取500mL乙晴与0.5mL甲酸于1L容量瓶中，用水4.2.2正已烷-丙酮溶液（28）：取20mL正已烷，加入80mL丙酮，混匀. 定容至IL，混匀.
4.3标准品
4.3.1二硝基苯胺类农药标准物质：参见附录A中表A.1.
4.4标准溶液配制
4.4.1二硝基苯胺类农药标准储备溶液：分别准确称取适量的二硝基苯胺类农药标准物质，用丙酮配制成浓度为1000mg/L的标准储备溶液，标准溶液避光于-18℃保存，保存期为12个月. 4.4.2二硝基苯胺类农药混合中间标准溶液：吸取适量的各标准储备溶液，用甲醇稀释成氟乐灵浓度为5.0mg/L，其它7种药物浓度为1.0mg/L的混合中间标准溶液，0C~4C避光保存，保存期为3个月. 4.4.3基质混合标准工作溶液：吸取适量的混合中间标准溶液，用空白样品提取液配成氟乐灵浓度为
20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L和200μg/L的基质混合标准工作溶液.当天配制.
4.5材料
GB 23200.692016
4.5.1石墨化碳黑固相萃取柱：3mL250mg，或相当者.用前3mL正已烷-丙酮溶液活化，保持柱体湿润.
4.5.2Oasis HLB，6mL，200mg，或相当者.使用前用5mL乙晴活化，保持柱体湿润.
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）.5.2分析天平：感量0.01g和0.0001g5.3粉碎机. 5.4组织捣碎机.5.5涡旋混匀器.5.6固相萃取装置，带真空泵. 5.7氮吹浓缩仪.5.8离心机：转速不低于5000r/min.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1黄豆、茶叶和大米
取代表性样品约500g，（不可用水洗）切碎后，用搞碎机将样品加工成浆状，混匀.试样均分为二份，装入洁净容器，密封，并标明标记.
6.1.2蔬菜、水果、鸡蛋、猪肉及鸡肝
二份，装入洁净容器，密封，并标明标记. 取代表性样品约500g，（不可用水洗）切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀.试样均分为注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行.
6.2试样保存
在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.黄豆、茶叶和大米试样于常温下保存.蔬菜、水果、鸡蛋、猪肉及鸡肝试样于-18°C以下冷冻存放.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1黄豆、大米、茶叶、鸡蛋、猪肉及鸡肝
对于茶叶、大豆、板栗、玉米样品，称取2.5g试样（精确至0.01g）.对于菠菜、蘑菇、苹果、牛肉、牛肝、鸡肉、鱼肉、牛奶样品，称取5g试样（精确至0.01g）.将称取的试样置于50mL离心管中，混匀器上混匀2min.5000r/min离心1min，吸取上层提取液于另一试管中.再分别加入4mL丙酮-正己 加入6mL饱和氯化钠水溶液，于涡旋混匀器上混匀30s，放置15min.加入6mL丙酮-正已烷溶液，在烷溶液重复提取两次，合并提取液，在45C下氮气流吹至约1mL待净化.
7.1.2蔬菜、水果
称取约5g（精确至0.01g）样品于50mL具塞离心管中，然后加入2g氯化钠，再加入15mL乙晴高速均质提取3min，于5000r/min离心5min，将乙层转移至25mL容量瓶中.残渣再用10mL乙晴重复提取一次，合并提取液，并用乙晴定容至25mL.
7.2净化
7.2.1黄豆、大米、猪肉
萃取柱，再用5mL乙晴淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于1.5mL离心管中，40C以下用氮 吸取全部浓缩提取液于SupclcleanCg固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相气吹至近干，残渣用乙晴水溶液定容至1.0mL.旋涡混匀后，过微孔滤膜，供液相色谱一质谱/质谱仪测定.
7.2.2蔬菜、水果
精确吸取5mL提取液5.0mL于15mL离心管中，40C以下用氮气吹至近干，用2.0mL正己烷-丙酮溶液溶解，转入Envi-carb固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相萃取柱，再
用3mL正已烷-丙酮溶液淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于15mL离心管中，40C以下用氮气吹至近干，残渣用乙水溶液定容至1.0mL.旋涡混匀后，过微孔滤膜供液相色谱一质谱/质谱仪测 定.
7.2.3茶叶、鸡蛋及鸡肝
部通过固相萃取柱，再用5mL乙晴淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于15mL离心管中，40C 吸取茶叶、鸡蛋及鸡肝浓缩提取液于OasisHLB固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全以下用氮气吹至近干，用2.0mL正已烷-丙酮溶液溶解，转入Envi-carb固相萃取柱中，以约1.5mL/min液于15mL离心管中，40C以下用氮气吹至近干，残渣用乙腊水溶液定容至1.0mL.旋涡混匀后， 的流速使样液全部通过固相萃取柱，再用3mL正已烷-丙酮溶液淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出过微孔滤膜，供液相色谱一质谱/质谱仪测定.
7.3测定
7.3.1液相色谱参考条件
a)色谱柱：Cn色谱柱，50mmX2.1mm（i.d.），1.7d.，或相当者；b）柱温：40C； c）进样量：10叫：d）流动相、流速及梯度洗脱条件见表1.
表1流动相、流速及梯度洗脱条件
时间 min um/m 流速 0.05%甲酸-5mM乙酸胺-水溶液 % 甲醇0 0.30 50 505.0 0.30 20 800.308.0 0 1009.5 0.30 50 50
7.3.2质谱参考条件
a)离子化模式：电喷雾离子源：b)扫描方式：正离子扫描： c）检测方式：多反应监测（MRM）：d分辨率：单位分辨率：其它参考质谱条件见附录B.
7.3.3定性测定
每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质 混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物.
表2使用液相色谱一串联质谱法定性时相对离子丰度最大容许误差
相对丰度（基峰） >50 % >20 %至 50 % >10 %至 20 % ≤10 %允许的相对偏差 ±20 % ±25 % %0C干 ±50 %
7.3.4定量测定
仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，基质混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量.样品溶液中待测物的响应值均应在 测定方法的线性范围内，如果超出线性响应范围，应用空白基质溶液进行适当稀释.在上述液相色谱一质谱条件下，二硝基苯胺类农药的保留时间分别为：氨磺乐灵（3.21min）、甲磺乐灵（3.41min）、
