中华人民共和国国家标准
GB31656.21-2025
食品安全国家标准 水产品中硝呋索尔代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of nifursol metabo lite residues in aquatic products by
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准
水产品中硝呋索尔代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法
1范围
DNSAH)残留量的制样和液相色诺-申联质谱测定方法. 本文件规定了水产品中硝呋索尔代谢物3，5-二硝基水杨酸（3，5-Dinitrosalicylic acidhydrazide，
本文件适用于鱼、虾、蟹及鳖等水产品可食组织中3，5-二硝基水杨酸肼（DNSAH）残留量的检测，其他水产品的检测可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T30891-2014水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的硝呋索尔代谢物DNSAH在酸性条件下水解，用2-硝基苯甲醛衍生化，乙酸乙酯液-液萃取、浓缩及超滤净化液相色谱-串联质谱仪测定内标法定量.
5试剂与材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.2晴酸铵（CH COONH）：色谱纯，5.1.3乙酸乙酯（CHO）：色谱纯.5.1.4二甲亚矾（CH.OS）：色谱纯.5.1.5乙晴（CHCN），色谱纯.5.1.62-硝基苯甲醛（C，HNO）：色谱纯. 5.1.7磷酸氢二钾（K:HPO）.5.1.8盐酸（HCI).5.1.9氨水（NHOH）：25%~28%.
5.2.10.5mol/L盐酸溶液：准确量取42mL盐酸，用水稀释并定容至1000mL.5.2.22mmol/L.醋酸铵溶液；称取0.15g醋酸铵，用水溶解并稀释至1000mL.5.2.30.05mol/1.2-硝基苯甲醛溶液：称取0.076g2-硝基苯甲醛-用二甲亚溶解并稀释至10mL，现用现配.
5.2.41.0mol/L磷酸氢二钾溶液：称取87.1g磷酸氢二钾，用水溶解并定容至500mL.5.2.510%乙精水溶液；准确移取10mL乙晴，用水稀释并定容至100mL.5.2.6氨水乙精溶液：准确移取35gL氨水，用10%乙晴水溶液稀释并定容至100ml.
5.3.13 5-二硝基水杨酸肼（3 5-Dinitrosalicylic acid hydrazide DNSAH.C;H ON CAS 号：955-07-5. 3. 23，5-硝基水杨酸腊-N (35-Dinitrosalicylic acid hydrazide-N，DNSAH-"N • C; H O N 7），纯度≥99%，或相当者.N:，CAS号：-09-1)：纯度≥95%，或相当者.
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液（1.0mg/mL）：取DNSAH标准品约10mg.精密称定，先用1mL二甲亚溶解，再用甲醇稀释并定容至10mL棕色容量瓶中，配制成浓度为1.0mg/mL标准储备液，-18C避光保存，有5.4.2标准中间液（1.0μg/mL）：准确移取1.0mg/ml.标准储备液0.1mL于100mL棕色容量瓶中， 效期为6个月，用甲醇稀释并定容，配制成浓度为1.0μg/mL的标准中间液，一18℃避光保存，有效期3个月.5.4.3标准工作液1（100ng/mL）：准确移取适量1.0μg/mL标准中间液用甲醇稀释成100ng/mL标准工作液1，现用现配.5.4.5内标储备液（0.1mg/mL)：取DNSAH-"N:内标标准品，精密称定，先用1mL二甲亚祺溶解，再 准工作液2，现用现配.用甲醇稀释并定容至10mL棕色容量瓶中.配制成浓度为0.1mg/mL内标储备液，-18℃避光保存，有效期为6个月，5.4.6内标工作液（0.1μg/mL)：准确移取适量DNSAH-N：内标储备液，用甲醇逐级稀释成浓度为0.1μg/mL的内标工作液，-18C避光保存，有效期3个月. 5.5材料5.5.1超滤离心管：10ku.
6仪器和设备
6.1液相色谱-串联质诺仪：配电喷雾离子源.6.3离心机：转速不低于6000r/min. 6.2分析天平：感量0.01g和0.00001g.6.4微量高速离心机：14000r/min6.5氮吹仪.6.6涡旋混合器.6.7pH计.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
按GB/T30891-2014附录B的要求制样a）取均质后的供试样品，作为供试试样；b）取均质后的空白样品，作为空白试样；c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液作为空白添加试样.
