中华人民共和国国家标准
GB 31656.23-2025
食品安全国家标准 水产品中利福平残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of rifampicin residue in aquatic products by liquidchromatography-tandemmass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
水产品中利福平残留量的测定 食品安全国家标准 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了水产品中利福平残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法.本文件适用于鱼、虾、蟹、海参等可食部分中利福平残留量的测定，其他水产品的检测可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T30891-2014水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的利福平经乙晴提取，乙睛饱和正已烷除脂净化，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量.
5试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1正己烷（CH（CH）CH）：色谱纯.5.1.2乙睛（CHCN)：色谱纯.5.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.4无水硫酸钠（NaSO）：分析纯.
5.2溶液的配制
5.2.1乙晴饱和正已烷：量取正已烷200mL于250mL分液漏斗中，加人适量乙晴后，剧烈振摇，待分配平衡后，弃去下层乙晴层，5.2.250%乙晴溶液：移取50mL乙精至50mL水中.混匀.5.2.30.1%甲酸溶液：移取0.1mL甲酸，用水定容至1000mL，混匀.5.2.40.1%甲酸乙溶液：移取0.1mL甲酸，用乙精定容至1000mL，混匀.
5.3标准品
利福平(Rifampicin CHN O CAS号：13292-46-1):含量≥97. 0%.利福平-D (Rifampicin-D CHD N O):含量≥97 0% .
5.4标准溶液的制备
5.4.1标准储备液：取利福平标准品10mg，精密称定，用乙晴适量溶解并定容于100mL棕色容量瓶，配制成溶液浓度为100μg/mL的标准储备液.一20℃下避光保存，有效期为1个月.
GB 31656.23-2025
液.现用现配.液.现用现配.瓶，配制成溶液浓度为100μg/mL的标准储备液.一20℃下避光保存，有效期为1年.中间液.现用现配.间液，现用现配.
5.4.2标准中间液：精密量取利福平标准储备液1mL.用乙晴稀释配制成浓度为10μg/mL的标准中间5.4.3标准工作液：精密量取利福平标准储备液1mL，用乙晴稀释配制成浓度为1μg/mL的标准中间5.4.4内标储备液：取利福平-D.标准品10mg精密称定用乙晴适量溶解并定容于100mL棕色容量5.4.5内标中间液：精密量取利福平-D 标准储备液1mL.用乙晴稀释配制成浓度为10pg/mL的标准5.4.6内标工作液；精密量取利福平-D 标准储备液1mL.用乙晴稀释配制成浓度为1μg/mL的标准中5.4.7内标使用液：精密量取利福平-D 标准储备液1mL.用乙晴稀释配制成浓度为0.1μg/mL的标准中间液.5.5材料5.5.1陶瓷均质子：2cm（长）×1cm（外径），或相当者.5.5.2尼龙微孔滤膜（有机相）：0.22μm.
6仪器和设备
6.1高效液相色谱-串联质诺仪：配电喷雾离子源（ESI）.6.2分析天平：感量0.000 01g和0.01g.6.3低温高速离心机；转速8000r/min以上.6.4多管涡旋混合器：转速2500r/min.6.5均质机；转速5000r/min以上. 6.6氮吹仪.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
a）取均质后的供试样品，作为供试试样； 试样的制备参考GB/T30891-2014附录B.b）取均质后的空白样品，作为空自试样；c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样.
7.2试样的保存
-18℃以下保存.
8测定步骤
8.1提取
g无水硫酸钠和10mL乙晴，涡旋混合器上以2500r/min，涡旋1min.超声10min，以8000r/min离心5min，取上清液转移至另一离心管中，样品残渣再加人5mL乙晴重复提取1次，合并上清液，待净化.
8.2净化
往上述乙睛提取液中加人10mL乙腾饱和正己烷，2500r/min涡旋混合1min，8000r/min离心5min，弃去正已烷层，将下层提取液转移到刻度离心管中，30℃氮吹至近干，加人1mL50%乙溶液，涡旋混合器上2500r/min，涡旋1min，0.22pm滤膜过滤，供液相色诺-串联质谱仪测定.
8.3标准工作曲线的制备
