中华人民共和国国家标准
GB 31657.5-2025
食品安全国家标准蜂产品中4种抗 病毒类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of four antiviral drugs residues in bee products by liquidchromatography-tandem mass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准
蜂产品中4种抗病毒类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了蜂产品中4种抗病毒类药物残留量检测的制样和液相色谱-串联质诺测定方法. 本文件适用于蜂蜜和蜂王浆中吗啉胍、金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
蜂蜜和蜂王浆中的残留药物用乙晴溶液提取，苯硼酸固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量.
5试剂和材料
以下所用试剂除特殊注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.2甲醇（CHOH）：色谱纯. 5.1.3乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.4氨水（NH OH）.5.1.5乙酸铵（CHCOONH4).
5.2溶液配制
5.2.10.1%甲酸溶液：取甲酸100μL 用水稀释至100mL，混匀.5.2.20.5%甲酸溶液：取甲酸500L.用水稀释至100mL，混匀.5.2.420%甲醇溶液：取甲醇20mL.用水稀释至100mL，混匀. 5.2.31%甲酸溶液：取甲酸1mL.用水稀释至100mL，混匀.5.2.580%乙晴溶液：取乙睛80mL.用水稀释至100mL，混匀.5.2.6乙酸铵溶液（0.2mol/L.pH8.5）：取乙酸铵1.54g.用水溶解并稀释至100mL，氨水调节pH至8.5.5.2.70.1%甲酸甲醇溶液：取0.1%甲酸溶液10mL.用甲醇稀释至100mL，混匀.5.2.80.5%甲酸甲醇溶液，取甲醇5mL.用0.5%甲酸溶液稀释至100mL 混匀.5.2.91%甲酸甲醇溶液：取1%甲酸溶液40mL.用甲醇稀释至100mL，混匀.5.3标准品及其纯度：金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚、吗啉肌、金刚烷胺-d：、金刚乙胺-d、美金刚-d和吗
GB 31657.5-2025
啉胍-d，含量均≥99%，具体信息见附录A.
5.4标准溶液配制
5.4.1抗病毒类药物及其内标物标准储备液：分别称取吗琳服及其同位素内标标准品约10mg.用0.1%甲酸-甲醇溶液溶解并定容至10mL.配制成1000μg/mL的标准储备液，分别称取金刚烷胺、金刚 乙胺和美金刚及其同位素内标标准品约10mg用甲醇溶解后定容至10mL，配制成1000μg/mL的标准储备液.于一18℃以下避光保存，有效期3个月.
5.4.2抗病毒类药物混合标准中间液：依次吸取4种抗病毒类药物标准储备液100gL，于10mL容量瓶中，用甲醇溶液定容至刻度，配制成浓度为10μg/mL的混合标准工作液.于一18℃以下避光保存，有效期1个月，
5.4.3抗病毒类药物混合标准工作液：精密量取抗病毒类药物混合标准中间液适量，用0.5%甲酸-甲醇溶液将其稀释成0.1pg/L0.5μg/L、1.0μg/L、10μg/150μg/L、100μg/L、500μg/L的系列浓度标准工作液.现用现配.
5.4.4抗病毒类药物同位素内标混合标准中间液：依次吸取4种抗病毒类药物同位素内标标准储备液金刚-d浓度为10μg/mL的抗病毒类药物同位素内标混合标准工作液.于一18C以下避光保存，有效 100pL，于10mL容量瓶中，用甲醇溶液定容至刻度，配制成吗啉胍-d、金刚烷胺-ds、金刚乙胺-d和美期1个月，
5.4.5抗病毒类药物同位素内标混合标准工作液：吸取抗病毒类药物同位素内标混合标准中间液100pL，于10mL容量瓶中，用0.5%甲酸-甲醇溶液定容至刻度，配制成吗啉胍-d、金刚烷胺-d：、金刚乙胺d和美金刚-d浓度为100ng/mL.的抗病毒类药物同位素内标混合标准工作液，现用现配.
5.5材料
5.5.1苯硼酸固相萃取柱；500mg/6ml.或相当者.5.5.2水系滤膜：0.22μm.5.5.3增强型脂质去除净化包（EMR-Lipid）或相当者.
6仪器和设备
6.1液相色谱-串联质诺仪：配有电喷雾离子源.6.2涡旋混合器.6.3高速冷冻离心机：转速8000r/min或以上，可控温度4℃，6.4水浴振荡器.6.5氮吹仪.6.6分析天平：感量0.00001g和0.01g.6.7移液器;10 μL、20 yul. 200 pl.、1 000 pL、5 000 yl 6.8pH计.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试蜂产品，将其搅拌均匀，对有结晶的蜂蜜样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中解晶，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温，制备好的试样置于样品瓶中，密封，并 做上标记.
a）取均质后的供试样品，作为供试试样；b）取均质后的空白样品，作为空白试样；c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样.
