中华人民共和国国家标准
GB 31658.27-2025
食品安全国家标准 动物性食品中庆大霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of gentamicin residues in animal derived food by liquidchromatography-tandem mass spectrometric method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 动物性食品中庆大霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了动物性食品中庆大霉素残留检测的制样和液相色谐-串联质谱测定方法.本文件适用于猪、牛、羊、鸡的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏组织以及牛奶和鸡蛋中庆大霉素C1、庆大霉素Cla、庆大霉素C2和庆大霉素C2a残留量测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
质谱测定，基质匹配外标法定量. 试样中残留的庆大霉素用磷酸盐缓冲溶液提取，混合型阳离子交换固相萃取柱净化.液相色谱-串联
5试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.2甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.4醋酸（CHCOOH）：色谱纯.5.1.5乙酸铵（CHCOONH）：色谱纯.5.1.6七氟丁酸酐（CFO）：色谱纯.5.1.7三氯乙酸（CCLCOOH）. 5.1.8乙二胺四乙酸二钠（CHNNaO）5.1.9磷酸二氢钾（KH:PO）.5.1.10 氨水（NH HO）.
5.2溶液配制
5.2.115%氨化甲醇溶液：量取氨水15mL.用甲醇稀释至100mL，现用现配.5.2.20.3%醋酸溶液：量取醋酸0.3ml.用水稀释至100ml.三氯乙酸20g，溶解混匀并用水稀释至1000mL，4C保存，有效期1个月.
5.2.42mol/L乙酸铵溶液：称取乙酸铵15.416g，用水溶解并稀释至100ml.5.2.50.1%甲酸溶液（含2mmol/L乙酸铵）：取2mol/L乙酸铵溶液1mL.甲酸1mL.用水稀释至1 000 mL.5.2.60.1%甲酸乙晴溶液；取甲酸1mL，用乙稀释至1000mL. 5.2.71%七氟丁酸酐酯酸溶液：量取0.5mL的七氟丁酸酐，用0.3%醋酸溶液稀释至50mL.现用现配.
5.3标准品
庆大霉素（Gentamicin，CHNO，CAS号：1403-66-3）：纯度≥94%.其中，C1组分（CAS号：25876-10-2)含量为31 0%，C1a组分（CAS号：26098-04-4）含量为22.2%，C2组分（CAS号：287916-51-2) 与C2a组分（CAS号：59751-72-3）含量为46.8%.各组分含量仅为参考，也可以采用相应单组分标准品.
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：取庆大霉素标准品约10mg，精确至0.1mg.用乙晴溶解并稀释成浓度为1mg/mL的标准储备液，置于一18C避光保存，有效期6个月.5.4.2标准中间液：准确量取庆大霉素标准储备液适量，用1%七氟丁酸酐醋酸溶液稀释定容，得到庆大 霉素浓度为10μg/mL，现用现配.5.4.3系列标准工作液：准确量取庆大霉素标准中间液适量，用1%七氟丁酸酐酯酸溶液稀释定容，得到庆大霉素浓度为5μg/L、10μg/L、50μg/L、100pg/L、200pg/L、500pg/L（其中，庆大霉素C1组分为1. 55 μg/L、3. 1 μg/L、15. 5μg/L、31 0 μg/L、62 0 pg/L、 155pg/L; 庆大霉素 C1a 组分为 1. 11 μg/L2. 22μg/L、11.1 μg/L、22.2 μg/L、44. 4μg/L、111pg/L;庆大霉素 C2庆大霉素 C2a组分为 2.34μg/L 4 68μg/L、23. 4 μg/L、46.8pμg/L、93.6μg/L、234 μg/L)的标准工作液，现用现配.
5.5.1混合模式的阳离子交换固相萃取柱：规格为60mg/3mL，或相当者，5.5.2微孔水系滤头：聚醚辑（PES）微孔滤膜，0.22m.5.5.3塑料进样小瓶.
6仪器和设备
6.1液相色谱-串联质诺仪：配电喷雾离子源（ESI.6.2分析天平：感量0.01g和0.00001g.6.3涡旋混合仪.6.4组织匀浆机.6.6高速冷冻离心机：转速不低于10000r/min. 6.5超声清洗仪.6.7固相萃取装置.6.8氮吹仪.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取新鲜或冷冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质.a）取均质后的供试样品，作为供试试样；b）取均质后的空白样品，作为空白试样；c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样.
7.1.1猪、牛、羊、鸡的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏组织
