GH
中华人民共和国供销合作行业标准
GH/T1109-2015
蜂蜜中丙酮醛含量的测定 高效液相色谱法
Determination ofmethylglyoxalinhoney-High performance liquid chromatography
中华全国供销合作总社 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草.本标准由全国蜂产品标准化工作组提出.本标准由中华全国供销合作总社归口.本标准主要起草人：陈磊、沈伟健、赵炜、栾军、马丽、吴斌、张睿、沈崇链、杨雯笙、袁娟、陈惠兰、 本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局.
刘善菁.
蜂蜜中丙酮醛含量的测定 高效液相色谱法
1范围
本标准规定了蜂蜜中丙酮醛的高效液相色谱测定方法. 本标准适用于蜂蜜中丙酮醛含量的测定.本标准丙酮醛的检测低限为20mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
蜂密样品用水溶解后，与邻苯二胺进行衍生化反应，用高效液相色谱进行测定，用外标法定量.
4试剂和材料
实验用水应符合GB/T6682中一级水的规定要求.
4.2甲酸：CHO，色谱纯.
4.3丙酮醛标准品：C H O，40g/100g水溶液（CAS:78-98-8）.
4.4邻苯二胺：CHN，分析纯.
4.50.1%甲酸水溶液：盘取1mL甲酸（4.2）置于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，配制成0.1%甲酸水溶液.
4.6衍生化试剂：称取邻苯二胺（4.4）0.6g（精确至0.01g）置于100mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，配制成6g/L的邻苯二胺水溶液，用于衍生化反应.
4.7标准储备液：精密称取丙酮醛标准品（4.3)100mg（精确至0.01mg）置于10mL容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，配制成4g/L的标准储备液.再准确吸取4g/L的标准储各液100uL于10mL容量 瓶中，用水稀释并定容至刻度，得40mg/L的标准储备液.两种浓度的标准储备液均置于4C冰箱保存.
2.0mg/L、4.0 mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、40.0mg/L、100.0mg/L的丙酮醛水溶液，现配现用.
4.9滤膜：有机相0.22μm
5仪器和设备
5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器.
GH/T 1109-2015
5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g.
5.3涡旅仪.
6样品的保存
取蜂蜜代表样品装人洁净容器内，密封，标明标记，于室温避光保存，
7试验方法
7.1供试样品溶液的制备
（4.6）混匀，在室温、避光条件下进行街生化反应8h以上，过0.22um有机滤膜后进样分析， 称取1g（精确至0.01g）蜂蜜溶于10mL水中，取0.5mL该蜂密水溶液与0.5mL衍生化试剂
7.2色谱条件
色谱柱：Ca，柱长150mm，内径4.6mm，填料粒径5μm；或性能相当的色谱柱；流速：1.0mL/min; 流动相：乙晴-0.1%甲酸水溶液（3：7，体积比），等度洗脱：柱温：30℃；检测波长：318nm；进样量：10μL.
7.3高效液相色谱测定
丙酮醛标准工作溶液（4.8）在高效液相色谱设定条件下分别进样，以丙酮醛衍生化产物的色谱峰面积为纵坐标、工作溶液浓度（mg/L）为横坐标，绘制6个浓度点的标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中丙酮醛衍生化产物的响应值均在仪器测定的线性范围内.在上述色谱条件下，丙酮醛标准品衍生物以及基质加标样品的色谱图见附录A中的图A.1.
7.4空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤（7.1~7.3）进行.
7.5结果计算
结果按式（1）计算：
式中：
X试样中丙酮醛的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C.-由标准曲线计算所得样液中丙酮醛的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；C 一由标准曲线计算所得空白试验中丙酮醛的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：v f -试样最终定容体积，单位为升（L）； 稀释倍数，本实验方法为20；m 一样品质量，单位为干克（kg）.
8回收率和精密度
丙酮醛回收率和精密度数据见附录B中的表B.1.
