中华人民共和国粮食行业标准
LS/T6113-2015
粮油检验粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇 测定胶体金快速定量法
Inspection of grain and oils-Detection of deoxynivalenol in grainRapid quantitative method of colloidal gold technique
国家粮食局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009及GB/T20001.4-2001给出的规则起草.
本标准由国家粮食局提出.
本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口.
本标准牵头起草单位：北京市粮油食品检验所.
本标准参加起草单位：国家粮食局科学研究院、河南国家粮食质量监测中心、湖南省粮油产品质量检测中心、辽宁中储粮质量监督检测中心、天津市粮油质量检验中心.
本标准主要起草人：尚艳娥、刘征、刘美辰、王松雪、秦学磊、倪小英、崔阳、李风旭.
粮油检验粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇 测定胶体金快速定量法
1范围
本标准规定了脱氧雪腐谦刀菌烯醇的胶体金快速定量检圈方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备、样品测定与结果表述.
本标准适用于小麦、 米等稳食及其制品中脱氧雪腐镰刀朗烯醇的快建定量检测.
方法检出限为12 μg/k
2规范性引用文件
件.凡是不生日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件对于本文件的应用是必不可少的， 是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
非食、油料检验扦样、分样法
GB 5491GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27404-2008实验案质量控制规范 食品理化检测
试样提取策中脱氧雪刀苗烯醇与检测条中胶体金微拉发生呈色反应，该色深我与试样中脱氧当腐镰刀菌烯醇含量相关.用读数仪测定检测条的颜色深浅，根据颜色深浅和读数收内置曲线自动计算出试样中脱氧当育德力菌烯醇的含量.
4试剂
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中三级水的要求.
4.1稀释缓冲液：由胶体金检测条配套提供，或按照其说明书配制.
4.2提取液：水或与胶体金检测条配套的提取液.
5仪器设备材料
实验室常规仪器、设备及材料.
5.1天平：分度值0.01g.5.3离心机：转速不低于4000r/min， 5.2粉碎机：可使试样粉碎后全部通过20目筛.5.4涡旋振荡器.5.5瓣育器；可进行45C恒温（控湿精度士1C）孵育，具有时间润整功能.
5.6读数仪：可测定并显示胶体金定量检测条的测定结果.
LS/T 6113-2015
5.7ROSA脱氧雪腐镰刀菌烯醇胶体金快速定量检测条”：需冷藏储存，具体储存条件参照使用说明；技术要求见附录A
5.8滤纸：采用Whatman2V（或等效）滤纸.
6样品制备
6.1扦样与分样
按照GB5491执行.
6.2样品处理
6.2.1取有代表性的样品500g，用粉碎机（5.2）粉碎至全部通过20目筛，混匀.
6.2.2准确称取10.00g试样于200mL具塞锥形瓶中，加入50.0mL试样提取液（4.2），密闭，用涡旋离心机（4000r/min）（5.3）离心1min.取滤液或离心后上清液100L于另一离心管中，加人1.0mL 中~（）~（）稀释缓冲液（4.1），充分混匀待测.
注：不同厂家的脱氧雪腐刀菌烯醇胶体金快速定量检测条所用的样品处理方法可能不同，应按照产品使用说明 的规定方法进行操作.
7样品测定
7.1将胶体金检测条（5.7）从冷藏状态（2C～8C）取出放置至室温.将孵育器（5.5）预热至45C.将检测条（5.7）平放在孵育器（5.5）凹槽中，打开加样孔.
7.3孵育5min后，取出检测条（5.7）观察C线（质控线）和T线（检测线）显色情况.若出现下述情况，视为无效检测.
b）C线出现，但弥散或严重不均匀； a）C线不出现；e)C线出现，但T或T线弥散或严重不均匀.
7.4选择读数仪（5.6）的脱氧雪腐刀菌烯醇检测频道并设定基质为00（MATRIX00），开始样品测定，测定需在2min内完成，读数仅（5.6）自动显示中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量.
后，按照7.1～7.4进行测定，其中基质设定为01（MATRIX01）.
注：不同厂家孵育器和读数仪的使用方法可能有所不同，应按照产品使用说明的规定进行操作.
8结果表述
试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量由读数仪自动计算并显示，单位为微克每千克（pg/kg），
9重复性
相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于算术平均值20%的情况不超过5%. 在同一实验室，由同一操作者使用相同仅器，按相同的测定方法，并在短时间内对同一被测试对象
附录A
（规范性附录）
胶体金快速定量检测条性能评价要求
体金快速定量检测类产品的技术性能进行验证，以确认其适用于本方法. 本附录参照GB/T27404一2008的要求，规定了胶体金定量检测试纸条的技术性能要求，用于对胶
A.1准确性
采用150pg/kg、1000gg/kg和2500pg/kg3个浓度水平的实物标准样品，每个浓度水平测定不低于2次，取平均值，计算检测条检测结果与实物标准样品的偏差，3个浓度水平的偏差均应控制在 一20%~20%之间.
A.2重复性
采用1000μg/kg浓度水平的实物标准样品，测定不低于6次，计算检测条批内变异系数，变异系数应≤15%.
A.3检出限
计算20份阴性样品测定均值加3倍标准差，其结果应小于或等于产品灵敏度标示值，
A.4批间稳定性
批内测定取平均值，计算检测条批间变异系数，变异系数应≤20%， 采用1000μg/kg左右浓度水平的实物标准样品，不得低于6个提次，每个批次测定不低于2次，
A.5质控
100pg/kg，阳性质控样品的检测结果应在500μg/kg~1500gg/kg范围内，表明本检测条质量合格. 按照产品说明要求，检测检测条自带的阴性质控和阳性质控样品，阴性质控的检测结果小于
