中华人民共和国农业行业标准
NY/T3114.1--2017
大豆抗病虫性鉴定技术规范 第1部分:大豆抗花叶病毒病鉴定技术规范
Technical specificationfor evaluation ofsoybean forresistance to pests-Part1:Technical specification for evaluation of soybean for
resistance to soybean mosaic virus disease
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T3114《大豆抗病虫性鉴定技术规范》分为6个部分:
第1部分:大豆抗花叶病毒病鉴定技术规范;第3部分:大豆抗霜霉病鉴定技术规范; 第2部分:大豆抗灰斑病鉴定技术规范;第4部分:大豆抗细菌性斑点病鉴定技术规范;第5部分:大豆抗大豆蚜鉴定技术规范:本部分为NY/T3114的第1部分. 第6部分:大豆抗食心虫鉴定技术规范.本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.本部分起草单位:吉林省农业科学院.本部分主要起草人:晋齐鸣、张伟、苏前富、宋淑云、李红、孟玲敏、贾娇、王永志.
第1部分:大豆抗花叶病毒病鉴定技术规范 大豆抗病虫性鉴定技术规范
1范围
本部分规定了大豆抗花叶病毒病鉴定技术方法和抗性评价标本部分适用于各种大豆种质资源 工接种鉴定及评价.
在适宜条件下,通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的一种技术.
人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2.9
病情指数diseaseindex
通过对植株个体发病程度(病情级别)数值的综合计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.
2.10
株系strain
同种病毒中不同来源的、血清学相关的,但生物学性状不完全相同,或对不同寄主植物及不同品种具有致病力差异的变异类群.
2.11
鉴别寄主differentialhost
用于鉴定和区分特定病原物的生理小种/致病性/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种、品系或材料.
3病原物接种体制备
3.1病原物分离
采集田间具有典型大豆花叶病毒病症状的植株叶片从中分离病原物,采用生物学鉴定或血清学鉴定等方法,确定分离株系为大豆花叶病毒(Soybeanmosaicvirus,SMV)后(参见附录A的A.1),进行纯化和致病性测定,保存备用.
3.2株系鉴定
用于抗病性鉴定接种的病毒分离物首先进行株系鉴定,鉴定方法参见A2.
3.3接种体的繁殖和保存
3.3.1接种体的繁殖
将供试株系人工摩擦接种在感病品种的无毒株上隔离繁殖,显症后采集上部新鲜病叶用作接种
毒源.
3.3.2接种体的保存
病毒株系可活体保存在防蚜网室或人工气候箱内种植的大豆幼苗上,也可将病叶保存在一80℃以下的超低温冰箱中.
4鉴定设计
人工接种鉴定需在筛网孔径为425um的防蚜网室内进行,网室大小根据供鉴材料的数量面定.鉴定材料按照生育期顺序排列,每品种种植行长5m,1行区,10cm等距点播.每15份~20份鉴定材料设1组抗病和感病对照品种.根据当地适合生育期选择已知抗病、感病且其抗感性稳定的材料作为对照品种.
5接种
5.1接种时期
接种时期在大豆植株第一个小叶(三出复叶)充分展开时.
5.2接种液制备
加人0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.0)将匀浆稀释20倍,配制成病毒接种液,接种前在接种液中添 在繁毒株上采集典型花叶病毒株系症状的新鲜叶片,剪碎后稍做冷冻,在低温条件下研磨成匀浆.加2%粒径为22pm的金刚砂并搅拌均匀备用.
5.3接种方法
采用人工摩擦接种法.接种时用短毛刷(如6号排笔)取少量制备好的病毒接种液,在第一个小叶(三出复叶)的叶面轻度摩擦造成微伤,然后立即用清水将叶面冲洗干净.
6病情调查
6.1调查时间
一般在接种20d~30d后调查.
6.2调查方法
全区逐份材料进行调查,根据病害症状描述,记载病情级别及调查总株数,计算病情指数(DI).
6.3病情分级
病情分级及其对应的症状描述见表1.
表1大豆抗花叶病毒病鉴定植株病情级别划分
病情级别 症状描述0 无症状反应1 轻花叶型,植株生长正常,叶片平展不皱,或有黄绿与暗绿相间的轻花叶 重花叶型,植株生长基本正常,叶片明脉微皱,有明显黄绿相间的现3 皱花叶型,植株生长接近正常,不矮化,叶片有波状斑或沿叶缘曲叶或泡状突起,黄化型叶片有5 黄斑7 皱缩型.植株生长不正常,略矮化及黄化,叶片明显皱缩,呈泡状畸形卷曲9 矮化型,植株极端矮化,叶片化映窄、畸形卷曲,严重的出现顶端坏死,芽枯或黄萎
6.4病情指数计算
按式(1)计算.
(Gxn)DI= NXS X100
式中:
DI 病情指数;
S 各病情级别的代表数值;N 各病情级别的植株数,单位为株: 调查总株数,单位为株:S 最高病情级别的代表数值.
7抗性评价
7.1有效性鉴定
当设置的对照品种达到其相应感病程度(感病DI>50),该批次视为有效.
7.2抗性评价标准
根据鉴定材料的发病程度(病情指数)确定其对大豆花叶病毒病的抗性水平,划分标准见表2.
表2大豆对花叶病毒病抗性评价标准
病情指数(DD) 抗性评价D2 高抗Highly resistant(HR)20<D≤5 抗病Resistant(R)35<DI≤50 感病Susceptible(S) 中抗Moderately resistant(MR)70<DI≤100 50<DI≤70 高感Highly susceptible(HS)