中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.18-2001代替GB/T14926.181994
实验动物
Laboratory animalMethod for examination oflymphocytic choriomeningitis virus (LCMV)
中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布
前
本标准是对GB/T14926.18-1994《实验动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法)的修订.
本标准删除了GB/T14926.18-1994中“酶联免疫吸附试验、同接免疫荧光法和免疫酶染色法"的内容.
本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.
本标准起草单位:中国实验动物学会.
本标准主要起草人:贺争鸣.
本标准于1994年1月首次发布.
中华人民共和国国家标准
实验动物 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法
GB/T 14926.18-2001代特GB/T 14926.18-1994
Laboratory animalMethod for examination oflymphocytic choriomeningitis virus (LCMV)
1范围
本标准规定了淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)的检测方法、试剂等,本标准适用于小鼠、豚鼠、地鼠LCMV的检测.
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用画构成为本标准的条文.本标准出版时,所示版本均为有效.标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.
GB/T14926.50-2001实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酵试验
3原理
根据免疫学原理,采用L.CMV抗原检测小鼠、鼠、地鼠血清中I.CMV抗体.
4主要试剂和器材
4.1试剂:4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原
在生物安全柜内,用LCMV感染Vero细胞,当病变达十~时,收获培养物.冻融三次或超声波处理后低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.
41.1.2正常抗原
Vero细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液.
41.2抗原片
在生物安全柜内,LCMV感染Vero细胞,每2~3d更换维持液,培养7~10d,用IFA法测定细胞内特异性荧光.当荧光达十十~十十十时,将细胞用胰酵消化分散,PBS洗涤涂片.室温干燥的同时,在紫外线下20cm处照射30min,冷丙酮固定10min,-20C保存.
4.1.3阳性血清
用丙内脂灭活ICMV抗原,免疫清洁或SPF小鼠、豚鼠、地鼠所获得的抗血清.4.1.4阴性血清