T/YALAS020-2025
Laboratory animal-Detection method ofmicrosatelliteDNAdetection ofgeneticdiversity for Alpacas
云南省实验动物学会 发布
目次
前1范围，2规范性引用文件3术语和定义 3.1实验羊驼3.2微卫星4检测方法.4.1采样4.3基因组DNA 提取 4.2微卫星DNA位点4.4PCR反应体系及扩增条件4.5PCR扩增产物检测4.6基因分型 45数据统计分析与结果判定， V
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由云南省实验动物学会提出.
本文件由云南省实验动物学会（YALAS）归口.
本文件起草单位：中国科学院昆明动物研究所、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、云南省实验动物学会.
物 、张伟、 王野、肖文娴、夏长友、陈洪岩、
实验动物羊驼微卫星DNA遗传学检测方法
1范围
本文件规定了实验羊驼微卫星DNA遗传学检测方法、数据统计分析与结果判定.
本文件适用于实验羊驼遗传质量控制及遗传组成分析等.
2规范性引用文件
仅该日期对应的版本适用于本文不注目期的开用文件/其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 物
NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
NY/T1673畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1实验羊驼laboratoryalpaca
经人工培育，对其携带的病原微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的羊驼.
3.2微卫星DNA microsatellite DNA
也称短串联重复序列或简单重复序列，指生物体基因组中由16个核苷酸组成的串联重复序列.
4检测方法
4.1采样
实验羊驼外观检查应无异常，核对编号：采集静脉血0.5mL，-20C低温保存，采样方法应按照NY/T541进行.
4.2微卫星DNA位点
羊驼微卫星DNA位点的名称、引物序列、等位基因数、PCR反应的退火温度应符合表1规定.
表1羊驼微卫星DNA位点
序号 名称 等位基因（n） 引物序列（5-3'） 参考范围（bp） 等位基因 退火温度LCA56 16 ATGGTGTTTACAGGGCGTTG 133-169 (C)1 GCATTACTGAAAAGCCCAGG 58LCA63 14 TTACCCAGTCCTTCGTGGG 190-254 562 GGAACCTCGTGGTTATGGAA3 LCA65 14 AACTCAGCTGTTGTCAGGGG TTTTTCCCCTGTGGTTGAAT 165-191 58GTGCAGCGTCCAAATAGTCA4 LCA66 24 CCAGCATCGTCCAGTATTCA 220-262 565 LCA68 10 TCCTGTCTGTGAGAAGGCTG 191-209 56CCGAAGGAAAAATAAAATGGAA TTCTGATGTATGGCATAGCGA6 LCA70 TGGGGGTAAGAGCAGGATAA 211-223 567 LCA71 CAGACATATACCTGTATCCGTATCTA 1-91 566 TTCAGTGTTTCCTCGCAATG8 LCA77 S1 TGTTGACTAGAGCCTTTTCTTCTTT GGGCAAGAGAGACTGACTGG 233-263 58YWLL02 GTGCACTCAGATACCTTCACA 278-290 569 TACATCTGEAATGATCGAOCC10 L0TAA CACATGCCTGTTCCCTCTGAT 150-152 58GACAAACCACAAGCATAAACC ATCAAGTTTGAGGTGCTTTCC11 YWLL08 3 CCATGGCATTGTGTTGAAGAC 135-177 6012 607AA 9 IOAAGTCTAGGAACCGGAATGC AGTCAATCTACACTCCTIGC 154-180 60CTCACAGACCACAGFFCCAGT13 YWLL19 6 AAGGTCCATCCATGTTGTCAC 137-161 6014 YWLL29 6 GAAGGCAGGAGAAAAGGTAG 218-232 56CAGAGGCTTAATAACTTGCAG15 YWLL30 3 AAGCAGGATAGTGGTGGAAGT TTAAGGGTTCCCTGTATTTGG 104-110 58AGTCTTGGTGTGGTGGTAGAA16 YWLL 36 7 TGCCAGGATACTGACAGTGAT 148-166 5617 YWLL38 3 GGCCTAAATCCTACTAGAC 841421 60CACATGACCATGTCCCCTTAT CCTCTCACTCTTGTTCTCCTC18 YWLL40 6 CCAGTGACAGTGTGACTAAGA 180-190 5819 YWLL43 10 ATACCTCTCTTGCTCTCTCTC 131-157 58
