T/ZJZYC
T/ZJZYC028-2025
延胡索霜霉病抗性鉴定与评价技术规程Technical code of practice for evaluation of Corydalis yanhusuo resistance to downymildew
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由浙江省中药材产业协会提出并归口.
本文件主要起草单位：浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所、东阳市良种推广中心（东阳市中药材研究所）、浙江省中药研究限公司、浙江省农业科学院玉米与特色旱粮研究所、东阳市种植业技术推广中心、浙江花园农业发展有限公司、东阳市马宅镇农业农村办公室.
本文件主要起草人：金怡、武军、王汉荣、孙健、蒋凯、石丽敏、吴云峰、俞新、吕健、杜晨、姜洪、曹米娜.
延胡索霜霉病抗性鉴定与评价技术规程
1范围
本文件规定了延胡索霜霉病抗性鉴定的术语和定义、鉴定程序、材料准备、接种鉴定、结果评价.本文件适用于延胡索Corydalis yanhusuoW.T.Wang对霜霉病的抗病性鉴定与评价.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，标注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不标注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
NY/T2118蔬菜育苗基质
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1延胡索霜霉病Corydalis yanhusuo downy mildew由紫茧霜霉菌（Peronospora corydalis deBary）侵染延胡索植株引起的病害.
3.2抗病性 disease resistance 植物所具有的能够克服或减轻病原物致病作用的可遗传性状.
3.3抗性评价resistance evaluation依据既定的技术标准，判定植物对特定病害的反应类型和抵抗水平的描述.
3. 4 病级disease rating人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
3.5接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
3. 6接种液inoculum suspension用于接种的、含有接种体的悬浮液.
病情指数disease index(DI)
通过对植物个体发病程度（病级）数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式，是描述发病严重度的综合指标.
4鉴定程序
延胡索霜霉病抗性鉴定程序包括材料准备、接种鉴定和结果评价3个阶段.鉴定流程如图1所示.
图1延胡索霜霉病抗性鉴定流程
5材料准备
5.1设施设备
无菌室、恒温培养箱、恒温振荡培养箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温的温室等.
5.2接种体准备
病叶片上的孢子囊和孢囊梗进行显微镜镜检，按附录A形态学特征鉴定为紫董霜霉菌（Peronospora 延胡索霜霉病菌的分离采用活体寄主法，采集具有典型霜霉病症状的延胡索叶片，用接种针挑取发corydalisdeBary）后.将延胡索霜霉病菌的游动孢子囊接种于延胡索感病植株上，随后置于温度15℃~20°C、相对湿度（RH）85%～95%隔离温室培养，实现分离纯化后，再接种扩繁，备用.
5.3病原菌保存
保存于-10°℃～-28℃的低温冰箱中，保存时间不宜超过2年. 种植感病品种，接种发病后活体隔离保存.或者采集通过活体分离纯化扩繁的发病叶片，阴干后，
5.4接种体确定
选择分布较广、致病力较强的病原菌优势菌株作为用于人工接种鉴定的接种体.
5.5接种体悬浮液配制
将具有典型霜霉病症状的延胡索叶片上的霜霉病菌霉层冲洗于无菌水中，制备成接种体悬浮液，现配现用.
5.6鉴定用苗培育
5.6.1播种
13cm、高10cm~13cm的塑料营养杯中，至2/3高度，排列整齐，用自来水浇透育苗基质.将待鉴定延 播种基质应清洁、无病、营养适宜，并应符合NY/T2118的要求，将育苗基质装入新的直径11cm～胡索的块茎以5%次氯酸钠溶液浸种10min，用清水冲洗3次，沥干水后播于营养杯中.每杯1个～2个块茎，然后用1cm~2cm厚的育苗基质覆盖块茎.每品种（系）播种30杯以上，重复3次，待用.
5.6.2接种前管理
播种后，温室温度维持在18℃～20℃，保持基质湿润：出苗后，温室温度维持在16°℃～18℃，基质湿度保持在60%～70%，正常栽培管理，不施用杀菌剂.
6接种鉴定
6.1对照品种
抗病性鉴定时，设置一个感病对照品种，感病对照不得缺省.感病对照宜选用在常规接菌量下病情指数大于50的本地区常规感病品种.鉴定中也可增设一个抗病对照品种，抗病对照品种可缺省，抗病对照宜选用在常规接菌量下病情指数小于35的本地区常规抗病品种.
6.2鉴定方法
6.2.1鉴定时间
每年3月上旬～4月中旬温度15°℃～20°℃时，为延胡索霜霉病抗性鉴定与评价的最佳时间.
6.2.2接种生育期
在延胡索苗3叶1心至5叶1心时进行延胡索霜霉病的抗病性接种鉴定.
6.2.3接种体浓度
用无菌水稀释接种体悬浮液，将浓度配制成1.0×10个孢子/mL～4.0×10个孢子/mL接种液.
6.2.4接种方法
用接种液喷雾延胡索植株叶片，以叶面均匀布满微小水珠为止.
6.2.5接种后管理
延胡索苗接种后，控制温室温度为16°℃～18°℃，相对湿度（RH)85%～100%，黑暗24h；以后每天光照12h～14h，温度保持在16°℃～18°℃，适时浇水并保持正常管理，不施杀菌剂.
6.3病情调查
6.3.1调查时间
接种后20d～25d进行调查.或根据感病的对照品种病级扩展到最高病级的时间作适当调整.
6.3.2病级
病级划分参见表1.
