中华人民共和国国家标准
GB/T31788-2015
Detection and identification of Cronartium conigenum Hedgcock et Hunt
中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.
本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局.
本标准主要起草人：杨翠云、魏亚东、孙娟、沈建国、胡培龙、于翠、网春月.
松球果锈病菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了植物中松球果锈病菌（Cronartium conigenum Hedgcocket Hunt)的检疫鉴定方法.本标准适用于松属（PinussPp.）、标属（QuercussPp.）和其他寄主苗木中携带的松球果锈病菌的检疫鉴定，
2仪器设备和试验用具
2.1仪器设备
生物体式显微镜、生物显微镜（具油镜和测微尺）、普通天平（感量0.1g）、超净工作台、高压灭菌器、冰箱.
2.2试验用具
斧子、锯子、手持放大镜、手术刀、手术剪、白色磁盘、镊子、载玻片、盖玻片、吸管、酒精灯.
3现场检疫
3.1松属植物：主要检查树木主干和分枝是否变形，球果是否受侵后膨大，球果是否在一层非常薄的纸 质的表面下产生大量的锈孢子，锈孢子新鲜时呈明亮的橙色，干燥时呈淡黄色.症状图参见附录A.
松球果锈病菌侵染松属植物引起的症状很易与Cronartiumstrobilinum（Southeastermconerust，or southern conerust）引起的症状相混淆，Cronartiumxtrobilinum为害症状和其他信息参见附录B和附录C.
3.2栎属植物：主要检查树木的叶片边缘底部是否有棕色渐变到黑色的绒状物出现，是病菌的冬孢子堆，
4实验室鉴定
4.1制样
特征， 将送检的植物样品通过挑片、切片等方法制成检测样品，在显微镜下直接观察病菌孢子的形态
4.2病菌的形态特征
4.2.1病菌的孢子类型
松球果锈病菌一生可产生5种类型的孢子，侵染松属植物产生性孢子和锈孢子，侵染栎属（QuercussPp.）和栗属（Castanea spp.）植物产生夏孢子、冬孢子和担孢子.
4.2.2病菌的形态
形，很少汇合.黏度一致，新鲜时呈明亮的橙色.上层壁像纸一样薄，沿着堆的边缘折裂，呈片状的剥 锈孢子堆过度生长，直径1mm~5mm（平均2.6mm），从上往下观察时，通常分散孤立，呈近圆落，往往留下撕裂状的边缘，由不规则、棍棒状或纺锤形的厚壁细胞组成，（28μm～100μm）×（14μm~32pm），内壁有条纹.锈孢子（19μm~51μm）×（12μm~25μm）（平均35μm×18μcm），呈卵球形或椭圆体，往往形状不规则，壁厚2μm~5μm，租糙多疣状结节.
有小而透明的棕色侧丝，（16μm~36μm）×（11μm~25μm）（平均25μm×18μm），从卵球形到椭圆 夏孢子通常生长在萎黄叶片的背面和表皮下面，分散或者聚集，很少汇合，壁迅速消失.夏孢子伴形，大量孢子聚在一起呈现明黄色，壁厚2μm~3.5μm，有1pm高的圆形刺，通常有3个~4个萌发孔.
变为淡棕色.冬孢子（20μm~50μm）×（10μm~23μm）（平均34μm×16μm），从圆柱形到梭形，涉 冬孢子堆是夏孢子堆的衍生物，冬孢子堆圆柱形，（2.8mm~6mm）×（70pm~150μm），由栗色棕色，壁厚2μm~6μm，儿乎光滑.
担子（32μm~40pm）×（7μm~9m），从网柱形到尿囊形，弯曲或者呈钩状，两端圆形，透明，壁薄，有3个横隔.观察不到担孢子.
松球果锈病菌的形态鉴别特征及形态示意图，参见附录A.
5结果判定
如果待检样品上病菌为害产生的症状与3.1或者3.2所描述的相符，经过镜检病菌孢子的形态特征与6.2所描述的相符，则判定样品中检出松球果锈病菌.
6样品保存与结果记录
6.1样品保存
将检出松球果锈病菌的植物病材料妥善保存于4C冰箱中，至少保存12个月，以备复核.保存期满后经高温高压灭菌处理.
6.2结果记录
记录包括：样品来源、种类、取样人员、实验的时间、地点、方法和结果、检验检疫员的签字等.应包测量数据. 含本标准规定的检测方法所产生的数据及图片：病菌为害症状的图片病菌各类孢子的形态特征图片和
附录A
A.1背景资料
A.1.1病菌基本信息
中文名：松球果锈病菌
学名 ：Cronartium conigenum Hedgcock et Hunt英文名：Southwestern cone rust
nales），柱锈菌科（Cronartiaceae)，柱锈菌属（Cronariam）.
相当长的一段时间. 传播途径：松球果锈病菌主要以风媒传播，在风力的作用下，锈孢子可传播很长的距离，并可存活
A.1.2方法原理
松球果锈病菌转主寄生松属和栎属植物可以产生典型的发病症状：病菌一生可以产生5种类型的孢子，并具有明显的形态特征.根据松球果锈病菌的寄主范围、症状特点以及病原菌的形态特征，进行 病菌的检疫鉴定，
A.2分布
松球果锈病菌主要分布在墨西哥（哈利斯科州）、美国（亚利桑那州、新墨西哥州）、伯利兹、哥斯达黎加、萨尔瓦多、危地马拉、洪都拉斯和尼加拉瓜等.我国未见分布报道.
A.3寄主范围
松（P.ellioti）、光叶松（P.leiophylla）、济华华松（P.leiophylla var.Chixahaana）、马西姆松 松球果锈病菌的锈孢子寄主主要是加勒比松（Pinuscaribaea）、道格拉斯松（P.douglasiana）、湿地（P.Maxintinoi）、米却背松（P.michoacana）、山松（P.montezamae）、卵果松（P oocarpa）、展叶松（P.patula）、拟北美洲乔松（P.pseadostrobs）、野松（P.radis）和卷叶松（P.reocote）等.
自然状态下，松球果锈病菌的冬孢子寄生主要是栋属（Querc#ssPP.）中的艾氏标（Querc#semoryi）、灰橡木（Q.grisea）、Q.hypoleuca和银叶橡树（Q.hyplieucoides）等.
在室温大棚条件下，人工接种则侵染栎属（Quercus spPp.）中的海岸栎（Quercus agrifolia）、美国橡树（Q.alba）、土耳其栎（Q.cerris）、猩红栎（Q.coccinea ）、蓝橡树（Q.donglasii）、根柏栎（Q.gambeli）、强生栎（Q.geminara）、鹅卵石橡树（Q.imbricaria）、大果栎（Q.macrocarpa）、马利兰tanoidex）、矮栎（Q.prinus）、英国栎（Q.robur）、北美红栎（Q.rubra）、黑栎（Q.telarina）和弗吉尼亚栎 德栎（Q.marilandica）、Q.minor、沼生栎（Q.palustris）、栓质标（Q.phellos）、悬铃树叶栎（Q.pla-（Q.virginiana）.还可侵染栗属（CastanegMilL.）中的 C.alnifolia×mollisima、美洲栗（C.dentata）、板栗（C.mollissima）、矮生板栗（C.pmil），欧洲栗（C.satia），以及镇（Caxtanopsis
