NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 4905-2025
南瓜属品种鉴定 SSR分子标记法
Identification of Cucurbita genus varieties-SSRmarkermethod
中华人民共和国农业农村部 了发布
目 決次
前言1范围. 2规范性引用文件，3术语和定义4缩略语原理..7溶液配制 主要仪器设备及试剂.8引物信息及使用参照品种及使用10操作程序11结果判定与表述 附录A（规范性） 主要仪器设备及试剂附录B（规范性） 溶液配制附录C（规范性） 引物及序列附录D（资料性） 引物相关信息附录E（资料性） 附录F（资料性） 引物分组 参照品种相关信息 1415
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种业管理司提出.
本文件由全国植物新品种测试标准化技术委员会（SAC/TC277）归口.
本文件起草单位：农业农村部科技发展中心、华南农业大学、岳阳市农业科学研究院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、广东和利农生物种业股份有限公司、安微江淮园艺股份有限公司.
本文件主要起草人：荆若男、邹佳龙、徐振江、武星廷、刘雪景、张凯渐、彭长城、杨坤、马莹雪、梁晋刚、谭斌、冯艳芳、李浪、王晨宇、陈木溪、杨忠周、付深造、王长林.
南瓜属品种鉴定SSR分子标记法
1范围
器设备及试剂、溶液配制、引物信息及使用、参照品种及使用、操作程序、结果判定与表述. 本文件规定了利用简单重复序列（SSR）标记进行南瓜属（CucurbitaLinn.）品种鉴定的原理、主要仪
本文件适用于中国南瓜（C，moschata Duch.）、美洲南瓜（C，pepoLinn.）和印度南瓜（C，ma.zimaDuch.）3个栽培种的品种DNA分子数据采集和品种鉴定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T3543.2农作物种子检验规程第2部分：扦样NY/T2594植物品种鉴定DNA分子标记法总则
3术语和定义
NY/T2594界定的术语和定义适用于本文件.
4缩略语
APS：过硫酸铵（ammonium persulphate). 下列缩略语适用于本文件.bp：碱基对（base pair).CTAB：十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrimethylammonium bromide）.dNTPs：脱氧核糖核甘三磷酸（deoxy-ribonucleoside triphosphates）. DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid).EDTA：乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetie acid).PAGE：聚丙烯酰胺减胶电泳（polyacrylamide gelelectrophoresis）.PCR聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）.SSR：简单重复序列(simple sequence repeat). Tag 酶 :DNA 聚合酶(Taq-DNA polymerase).TBE：三羟甲基氨基甲烷-硼酸盐-乙二胺四乙酸（Tris-borate-EDTA）.TE：三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸（Tris-EDTA）.TEMED：四甲基乙二胺（N N N' N'-tetramethylethylenediamine). Tris：三羟甲基氨基甲烷[Tris(hydroxymethyl)methyl arminomethane THAM].
5原理
南瓜基因组存在着大量能够稳定遗传的SSR位点，不同南瓜品种在同一SSR位点的重复次数可能存在差异，这种差异可利用DNA提取、PCR扩增及电泳等方法进行检测，进面通过一组SSR引物组合区 分不同的南瓜品种.
6主要仪器设备及试剂
主要仪器设备及试剂见附录A.
