NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T5403.3-2026
病毒微生物农药斜纹夜蛾核型 多角体病毒第3部分：斜纹夜蛾核型 多角体病毒可湿性粉剂
Virus-based insecticides-Spodoptera lituranucleopolyhedrovirus (SpltNPV)Part 3:Spodoptera lituranucleopolyhedrovirus wettable powder(WP)
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则>的规定起草.
发布了以下部分： 本文件是NY/T5403《病毒微生物农药斜纹夜蛾核型多角体病毒》的第3部分.NY/T5403已经
第1部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒母药：
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种植业管理司提出.
本文件主要起草人：类承风、王晓军、孙修炼、胡茂、郭明程、田义超、张楠、陈立萍. 本文件起草单位：农业农村部农药检定所、中国科学院武汉病毒研究所、湖北天勤生物科技有限公司.
病毒微生物农药斜纹夜蛾核型多角体病毒 第3部分：斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂
1范围
签、包装、储运和质量保证期. 本文件规定了斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂的要求，试验方法，产品的检验与验收，标志、标
本文件适用于以病毒包涵体为主要成分的斜纹夜蛾核型多角体病毒母药添加适宜助剂加工面成的斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验收规则GB/T1605商品农药采样方法 GB3796农药包装通则GB/T4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB/T5451农药可湿性粉剂润湿性测定方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T14825农药悬浮率测定方法GB/T16150农药筛析试验方法GB/T20813农药产品标签通则GB/T28137农药持久起泡性测定方法GB/T30361农药干燥减量的测定方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
powder (WP) 斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus（SpltNPV）wettable
以斜纹夜核型多角体病毒母药与适宜的载体、湿润剂、分散剂及填料混合均匀的可湿性粉制剂.
病毒包涵体occlusionbody（OB）
病毒水平传播的主要载体形式，其结构特征是病毒粒子包埋于蛋白质基质的多角体中.
3.3
生测效价比potency ratio
根据药物的药理和对生物体的作用设计试验，比较样品、标准品引起的生物反应，测定药物效价或其生物学活性.
3. 4
菌落形成单位colonyforming units（CFU）
由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落.指在琼脂平板上在一定温度下，经过一定时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数目的单位.
3.5
杂菌菌落总数numberofmicrobial contaminants
将斜纹夜蛾核型多角体病毒母药样品稀释后涂布在琼脂营养培养基上，在一定温度下，经过一定时间培养所得到的微生物（真菌和细菌）菌落数之和.
4要求
4.1外观
通常为灰白色至棕褐色均匀粉状物.
4.2规范项目及指标
斜纹夜蛾核型多角体病毒可湿性粉剂还应符合表1的要求.
表1斜纹夜核型多角体病毒可湿性粉剂控制项目指标
项目 指标病毒包涵体含量.OB/g 生测效价比（标准品L.C/待测样品LC）.% 标示值 ≥80. 0杂菌菌落总数，CFU/g <1.0×10PH范围 悬浮率.% 6. 0 ~8. 0 80 0干燥减量.% ≤5 0润湿时间. 细度（通过75mm试验箱）.% 95.0 120持久起泡量（1min后）.ml ≤30 0 5试验方法 5.1一般规定 除非另有说明，本文件所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液，试验用水为GB/T6682中规定的三级水. 5.2抽样 于200 g 按照GB/T1605中“固体制剂采样”方法进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量应不少 5.3PCR扩增及DNA测序法对病毒毒种的鉴定 提取试样中病毒DNA作为模板，用杆状病毒poh基因、lef-8基因及lef-9基因的简并性引物（连接m13通用引物序列）进行PCR扩增反应，琼脂糖凝胶电泳检测后，用m13通用引物对PCR产物进行测序，将测序结果与斜纹夜核型多角体病毒G2株的polh基因、Lef-8基因及lef-9基因的核苷酸序列进 行比对分析，这3个基因的核昔酸一致性均大于98%，即认定试样中的病毒为斜纹夜蛾核型多角体病毒. 斜纹夜蛾核型多角体病毒有效成分描述见附录A. 斜纹夜蛾核型多角体病毒毒种的鉴定按照附录B的规定执行. 5.4病毒包涵体含量的测定 5.4.1方法提要 斜纹夜蛾核型多角体病毒包涵体含量的测定采用血球计数板计数法.称取少量病毒试样，用定量的水稀释成悬浮液，并稀释至适当倍数后，滴加在血球计数板上，在光学显微镜下计数.根据血球计数板上病毒包涵体的数量以及稀释倍数，计算出单位质量（体积）病毒的数量. 5.4.2仪器、设备 分析天平：精确至0.0001g.
