ICS67.050 CCS C53 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5439.4—2022 出口食品中食源性致病菌快速检测方法 PCR-试纸条法第4部分：克罗诺杆菌 Rapid detection of foodborne pathogens from exported food by PCR-Lateral flow dipstick method-Part 4:Cronobacter 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5439.4-2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件是SN/T5439的第4部分.SN/T5439已经发布了以下部分： —第1部分：沙门氏菌； —第2部分：金黄色葡萄球菌； —第3部分：副溶血性弧菌； —第4部分：克罗诺杆菌； —第5部分：产志贺毒素大肠埃希氏菌及大肠埃希氏菌0157； —第6部分：空肠弯曲菌： ——第7部分：单核细胞增生李斯特氏菌. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本文件起草单位：中华人民共和国南京海关、中华人民共和国上海海关、南京农业大学、合肥工业大 学、苏州蝌蚪生物技术有限公司、广东省科学院微生物研究所、广东环凯生物科技有限公司、杭州傲敏生 物科技有限公司. 本文件主要起草人：袁辰刚、孙欣、薛峰、蒋原、曾海燕、蔡淑珍、曲晓莹、申进玲、陈伟、曾德新、 戴建君、苏静、陆寿祥、曾静. I SN/T5439.4-2022 出口食品中食源性致病菌快速检测方法 PCR-试纸条法第4部分：克罗诺杆菌 1范围 本文件规定了出口食品中食源性致病菌克罗诺杆菌快速检测的PCR试纸条方法. 本文件适用于出口食品中克罗诺杆菌的定性检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件. GB4789.40一2016食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403一2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 克罗诺杆菌Cronobacter 其为革兰氏阴性无芽孢杆菌，具有周生鞭毛、有动力，兼性厌氧，大多数产黄毒素，具有葡萄糖苷 酶活性，是一种常见的病原菌. 4缩略语 下列缩略语适用于本文件. DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonuleic acid) dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonuleoside triphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid) FITC:异硫氰酸盐(fluorescein5 isothiocyanate) Tris:三羟甲基氨基甲烷[tris(hydroxymethyl)aminomethane] 5方法原理 对样品中克罗诺杆菌进行增菌培养后提取DA 采用上游和下游引物分别经地高辛和异硫氰酸盐 标记的克罗诺杆菌的特异性检测引物进行PCR扩增.检测用试纸条上含有金标记的抗异硫氰酸盐的 抗体，可与PCR产物上的异硫氰酸盐标记分子结合，在检测线位置上有抗地高辛抗体，可与PCR产物 上的地高辛标记分子结合...
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