NY
中华人民共和国农业行业标准
蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的测定 高效液相色谱法
Determination of 2acetylfuran3-glucopyranoside in honey-High performance liquid chromatography
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部畜牧兽医局提出.
本文件由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274）归口.
本文件起草单位：中国农业科学院蜜蜂研究所、云南省农业科学院蚕蜂研究所.
本文件主要起草人：吴黎明、赵柳微、薛晓锋、彭文君、李强强、赵洪木、张冯斌、方冲伟、牛占山、姜玉锁、王胤晨.
蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的测定高效液相色谱法
1范围
本文件描述了蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的高效液相色谱测定方法.本文件适用于蜂蜜中2-乙酰呋嘴-3-葡萄糖苷的测定. 本文件的方法检出限为0.5mg/kg，定量限为1.0mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
2术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中的2-乙酰呋响-3-葡萄糖昔用水提取，高效液相色谱法测定，外标法定量.
5试剂或材料
除非另有说明仅使用分析纯试剂.5.1水：GB/T6682，一级水.5.2甲醇：色谱纯.5.3标准储备溶液（1000mg/L）：准确称取10mg（精确至o.01mg）2-乙酰映哺-3-葡萄糖苷（CAS号：5.4标准系列溶液：分别准确吸取适量的标准储备溶液（5.3）.用水配制成浓度分别为0.5mg/L、1.0 85559-61-1，纯度≥95%）于10mL棕色容量瓶中，用乙晴溶解定容，于2℃～8℃C保存，有效期2个月.5.5滤膜：0.45pm，水系.
6仪器设备
6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器.6.2分析天平：感量0.01mg和0.001g.6.3高速冷冻离心机：转速不低于10000r/min.6.4水溶锅：精度士1℃.
7样品
将样品（若有结晶，45C水浴融化）搅拌均匀，取0.5kg置于样品瓶中，2℃～8℃密闭保存.
8试验步骤
8.1提取
平行做两份试验.若试样有结晶，45C水浴融化，搅拌均匀，准确称取5g（精确至0.001g），置于
NY/T 4643-2025
10mL容量瓶中，用水溶解并定容，摇匀.全部转移至离心管中，涡旋5min，10000r/min离心5min，上清液过膜，待测.
8.2液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：C（可耐受100%水），长150mm，内径2.1mm，粒径3.5μm；或性能相当者；b）流动相A：水（5.1)；c）流动相B甲醇（5.2）；e）流速：0.2mL/min; d）梯度洗脱程序见表1；f）柱温：30℃；g）波长：280nm;h）进样量：10p.
表1梯度洗脱程序
时间.min A.% B.%10 0 99 99 1 115 90 1016 22 10 10 90 9023 33 99 199 1
8.3测定
在仪器的最佳条件下，分别取标准系列溶液和试样溶液上机测定.2-乙酰呋响-3-葡萄糖苷标准溶液的液相色谱图见附录A.
8.4定性
以保留时间定性，试样溶液中2-乙酰呋哺-3-葡萄糖苷保留时间应与标准系列溶液（浓度相当）的保留时间一致，其相对偏差在士2.5%之内.
8.5定量
以2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷标准系列溶液的浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，其相关系数应不低于0.99.试样溶液中2-乙酰呋哺-3-葡萄糖苷的浓度应在标准曲线的线性范围内，如超出线性范围，应重新测定，单点校准定量时，试样溶液中2-乙酰呋哺-3-葡萄糖苷浓度与标准溶液浓度相差不超过30%.
9试验数据处理
试样中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的含量以质量分数w计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示.多点校准按公式（1）计算，单点校准按公式（2）计算.
式中：
P一-从标准曲线中得到的被测组分的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L)；
V一-试样最终定容体积，单位为毫升（mL）；
m-试样的质量，单位为克（g）.
式中：
